食用菌实训教案.docVIP

实训一? 食用菌的形态特征观察（2学时） 一、实验目的 1．弄清食用菌生活史的基本过程。孢子---菌丝体---子实体---孢子 2．掌握孢子印及孢子的收集方法。 3．观察菌丝体的形态特征。 4．观察和掌握常见食用菌子实体的形态特征。 二、实验材料 1．各种干、鲜食用菌子实体，液浸标本，干制标本。 品种有：平菇、香菇、双孢磨菇、金针菇、草菇、鸡腿菇；银耳、黑木耳、毛木耳；猴头、竹荪、灵芝；紫陀螺菌、松乳菇。 2．各种食用菌菌丝体（菌种）。 三、实验内容与方法 （一）识别各种食用菌子实体的形态特征 首先观察各种食用菌子实体的组成部分及其形态特征。然后用解剖刀纵切子实体观察其菌盖组成，菌肉的颜色、质地，菌褶形状和着生情况（离生、延生、直生、弯生）等。再观察其菌柄的组成，菌柄的质地，中实或中空等。 （二）观察双核菌丝及其锁状联合的形态构造 1．将清洁的载片中央滴半滴水。 2．用接种针（或解剖针）于试管斜面或培养料内挑取少许菌丝体置于载玻片液滴中，并用接种针或解剖针将菌丝体挑开使之分散。 3．用镊子加盖玻片，注意避免产生气泡。 4．用高倍镜观察双核菌丝体及锁状联合的形态构造。 四、实验报告 1．根据实验情况填写下列表格： 食用菌名称 分类地位 主要形态特征 主要功能 　 　 　 　 2．学习体会。 实训二、三? 食用菌一级菌种的制作技术（6学时） 备注：一级菌种制作分两次实验完成，第一次实验主要配制培养基并灭菌、检验灭菌效果，占用4学时；第二次实验主要进行菌种分离、转管及培养。占用2学时。（时间不够利用课外时间补） 食用菌又名母种，多用试管作为容器，因此又称试管种，是指经组织分离、孢子分离或基内菌丝分离而得到的菌丝体。一级菌种培养基常用于菌种的分离、纯化、扩大、转管和菌种保藏。一级菌种的制作过程可分培养基的制作、灭菌、接种和培养等几个主要阶段。 一、实验目的 通过实验，使同学们掌握培养基的制作、消毒与灭菌、菌种分离（组织分离）、转管、培养等操作技术和方法。 ??二、实验材料 手提式高压灭菌锅、接种箱或超净工作台、电热恒温培养箱、玻璃漏斗、漏斗架、止水夹、铝锅、电炉、1000mL量杯、纱布、棉花、18mm×180mm试管、细线绳、防潮纸或牛皮纸、刀、马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、2cm厚长形木条、pH试纸、1mol／L Na0H溶液、1mol／L HCl溶液、酒精灯、75％酒精消毒瓶、75％酒精消毒棉球瓶、无菌培养皿、镊子、解剖刀、接种针、待分离的菇种、待移接的菌种、火柴、记号笔等。 ?三、实验内容与方法 ?(一) 培养基的制作 1．配方：马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基)：马铃薯(去皮)200g，蔗糖20g，琼脂20g，水1000ml，pH自然。 2．配制方法 (1) 先将马铃薯洗净，去皮，挖掉芽眼，称取200g，切成1cm3的小块或薄片。 (2) 将切好的马铃薯块放人铝锅内或大烧杯中，加水1000ml，放在电炉上煮沸后维持15～20min，至马铃薯熟而不烂。 (3) 用4层湿纱布(纱布需浸水后拧干)过滤，由于马铃薯在煮沸过程中，有部分水被蒸发掉，所以过滤后的马铃薯汁，应加水补足水分至1 000ml。 (4) 将称好的琼脂加入马铃薯汁中，在电炉上用文火煮，直至琼脂完全融化 (边煮边搅拌)，再次用4层湿纱布(纱布需用热水浸湿后拧干)过滤。最后加入蔗糖等可溶性物质，搅匀。 (5) 调节pH值：培养基中的酸碱度(即pH值)是影响菌丝生长的重要因素，因此培养基配好后应根据菌种对pH值的要求进行调节。马铃薯蔗糖琼脂培养基配好后，pH值一般为中性，所以不必调节。如培养基低于所要求的pH值时，应向培养基中滴加1mol／L的NaOH溶液；若培养基高于所要求的pH值，应滴加1mol／L的HCl溶液进行调节。边滴入，边搅拌，边用精密pH试纸或pH计测定，直至合适为止。应该注意的是培养基的酸碱度在灭菌前不宜调至pH值6.0以下，否则灭菌后培养基不凝固。有些菇类的培养基要求在pH值6.0以下的，要待灭菌后在无菌条件下滴加盐酸或乳酸等进行调节。 (6) 补水至1000ml。 (7) 分装试管：培养基配好后应趁热用分装漏斗进行分装试管，装入试管高度的1/5～1/4，分装时应注意不得使培养基粘在试管的口壁上，以防污染杂菌。 (8) 塞棉塞：培养基分装完以后应立即塞上大小合适的棉塞或透气的胶塞。棉塞或胶塞应塞入试管内2/3，外留1/3。 (9) 捆扎试管：将塞好棉塞的试管7或9支扎成一把，在棉塞外面包一层防潮纸或牛皮纸，再用线绳扎紧，防止灭菌时棉塞被冷凝水浸湿。 (二) 灭菌 培养基分装完后应立即灭菌。根据培养基的成分选择灭菌的压强和时间，如培养基成分中有高温下容易破坏的物质时，可采用0.5kg/cm2或0.8kg/cm2的压强，一般马铃薯蔗糖琼脂培养基采用1.0