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小麦与大豆种子中主要水解酶同工酶特性研究本科论文定稿
毕 业 论 文
设计（论文）题目
学院名称
专 业 （班 级）
目 录中文摘要 1
英文摘要 2
1 前言 3
1.1 淀粉酶 3
1.1.1 α-淀粉酶 4
1.1.2 β-淀粉酶 4
1.1.3 淀粉酶的研究进展 5
1.2 酯酶 7
1.2.1 酯酶的分类 7
1.2.2 酯酶的理化性质 8
1.2.3 酯酶的研究进展 8
1.3 蛋白水解酶 8
1.3.1 蛋白酶的分类 9
1.3.2 蛋白酶的水解特性 9
1.3.3 植物蛋白酶的研究进展 9
2 材料与方法 11
2.1 试验材料 11
2.2 主要仪器设备 11
2.3 总体实验流程 11
2.4 材料处理 11
2.5 粗酶液的制备 11
2.6 PAGE电泳及同工酶染色 11
2.6.1 淀粉酶同工酶染色 12
2.6.2 酯酶同工酶染色 12
2.6.3 蛋白水解酶同工酶染色 12
2.7 pH对淀粉酶同工酶的影响 12
2.8 淀粉酶同工酶的pH稳定性实验 12
2.9 温度对淀粉酶同工酶的影响 12
2.10 淀粉酶同工酶的热稳定性实验 12
2.11 淀粉酶同工酶对金属离子敏感性实验 13
3 结果与分析 14
3.1 小麦与大豆中的淀粉酶同工酶酶谱分析 14
3.2 小麦与大豆中的酯酶同工酶酶谱分析 15
3.3 小麦与大豆中的蛋白水解酶同工酶酶谱分析 17
3.4 pH对小麦种子中淀粉酶同工酶的影响 18
3.5 小麦种子中的淀粉酶同工酶的pH稳定性实验 19
3.6 温度对小麦种子中淀粉酶同工酶的影响 20
3.7 小麦种子中淀粉酶同工酶的热稳定性实验 20
3.8 小麦种子中淀粉酶同工酶对金属离子敏感性实验 21
4 讨论 22
4.1 淀粉酶 22
4.2 酯酶 22
4.3 蛋白水解酶 23
5 结论 25
致谢 26
参考文献 27
小麦与大豆种子中主要水解酶同工酶特性研究摘要：聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）活性电泳技术，对萌发过程中小麦和大豆种子中胚芽、胚乳和胚根三大组织部位存在的淀粉酶、酯酶、蛋白水解酶的同工酶图谱进行了研究并对小麦种子中的淀粉酶同工酶的pH、温度金属离子敏感性影响及其稳定性。实验结果表明，在小麦种子胚乳淀粉酶、酯酶同工酶变化较明显，而蛋白水解酶变化较大的则是在胚芽和胚根当中。吸涨12 h内大豆中的淀粉酶、酯酶、蛋白水解酶同工酶谱带变化差异不。小麦种子中的淀粉酶同工酶生化特性研究显示：淀粉酶同工酶的最适pH在5.2左右，pH 5.0~9.0范围内均具有较好的稳定性；最适温度为40℃，在0℃~50℃大部分淀粉酶同工酶的活性基本上保持稳定；重金属离子Hg2+对淀粉酶同工酶的抑制作用最为强烈，几乎将近100%，其它金属离子Cu2+, Pb2+, Zn2+也不同程度的抑制了淀粉酶的活性。关键词：小麦大豆；萌发淀粉酶；酯酶；蛋白水解酶
Abstract：The isoenzymes of the three major hydrolysis enzymes i.e. amylase, esterase and protease in wheat and soybean in the three major parts i.e. embryo, endosperm and radicle during seeds germination have been investigated by the native PAGE. Meanwhile the effects of pH value and temperature on amylase and its stability in wheat seeds were studied as well as the sensitivity of isoenzymes to metal ions. The results indicated that isoenzymes of amylase and esterase changed significantly in endosperm during the process of germination while isoenzymes of protease exhibited significant variation in embryo and radicle. The isoenzymes of amylase, esterase and protease had little variation during the first 12h of imbibition of the soybean seeds. The study on the bioche
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