铜介导的多酚涂层用于心血管材料表面改性的研究-生物医学工程专业论文.docx

研究生优秀毕业论文西南交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1．保密口，在年解密后适用本授权书2．不保密《适用本授权书．(请在以上方框内打“4”)(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：“力沌指导教师签名：飓日期：pfn’f年曰期：加rj一、v5-￡户万方数据西南交通大学硕士学位论文主要工作(贡献)声明本人在学位论文中所做的主要工作或贡献如下：1．通过浸涂(dip．coating)的方法，在316L不锈钢(316LSS)表面沉积多酚化合物的掺铜薄膜，对材料表面进行修饰。该薄膜具有催化NO供体分解释放出NO的能力，论文对该催化活性薄膜的催化能力及生物学性能进行评价。2．通过NO体外催化释放实验、血小板实验、平滑肌细胞实验对构建的催化活性层进行表征及评价。通过内皮细胞实验对薄膜细胞毒性进行评价。通过XPS、SEM、FTIR、AFM等对制备的表面进行材料性能的检测。3．本论文尝试构建负载铜的多酚交联表面，探讨掺铜与催化能力的关系。本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立进行研究工作所得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均己在文中作了明确说明。本人完全了解违反上述声明所引起的一切法律责任将由本人承担。学位论文作者签名：立l≥f仨l踏?训孓jYj哒万方数据西南交通大学硕士研究生学位论文第J页于两斐一氧化氮(NO)是健康内皮细胞产生的重要的生物分子，又被称为内皮细胞舒张因子，能够有效抑制血小板的激活和粘附，同时抑制平滑肌细胞增生。近期国内外研究结果显示NO供体型材料能够通过释放NO分子，改善材料表面的抗凝血和抑制平滑肌增殖的性能。在还原剂GSH存在下，Cu0)具有很强的催化作用，能够呈现催化内源性NO的供体物质RSNO分解释放出NO的活性。利用铜离子为催化剂催化产生NO用于心血管材料改性也是目前的研究热点之一。本论文拟在生物医用不锈钢表面构建铜离子负载的催化活性修饰层，使其具有原位催化内源性NO供体分解释放NO的性能，以期改善材料的抗凝血抗增生能力。首先制备了四种不同投料比的胶原与EGCG／CA掺铜涂层，该涂层表面含酚羟基、酰胺键、氨基、醌基等多种官能团，胶原和多酚EGCG发生了迈克尔加成反应和西弗碱反应，并成功地负载了铜，多酚与铜发生了氧化还原反应，使Cu(II)被还原成Cu(I)和Cu(0)。TEM及XPS结果显示铜可能不仅以铜(VII)的形式还有可能以纳米粒子表面绑定形式参与在胶原多酚交联形成的薄膜中。NO体外催化释放实验结果说明，胶原多酚掺铜涂层表面能够有效催化SNAP释放NO；体外血小板粘附与激活实验以及血小板cGMP检测结果显示出胶原多酚掺铜涂层催化供体释放的NO能显著抑制血小板的粘附与激活。体外平滑肌细胞评价说明胶原多酚掺铜涂层可以有效抑制血管平滑肌细胞的粘附，且体外内皮细胞粘附和增殖评价显示胶原多酚掺铜涂层对内皮细胞并无毒性作用。另外，本论文还成功构建了邻苯二酚／聚乙烯亚胺涂层，并调整了两者的投料比，制备不同氨基与酚羟基量的表面后掺铜，三种邻苯二酚／聚乙烯亚胺载铜涂层均具有催化NO供体释放NO的活性，且随着涂层中铜含量的升高催化的NO释放量增高。体外血小板粘附实验表明，邻苯二酚／聚乙烯亚胺载铜涂层在供体存在情况下具有很好的抑制加入富板浆中的胶原导致的血小板激活的能力，体外平滑肌细胞评价结果表明，邻苯二酚／聚乙烯亚胺载铜涂层能够抑制平滑肌细胞的增殖和迁移。综上，本论文通过两种途径在不锈钢表面成功构建了催化活性层。构建的催化活性层能够催化内源性NO供体释放NO，诱导血小板和平滑肌细胞中cGMP的生成，抑制血小板的粘附和激活，并且抑制平滑肌细胞的粘附和增殖。关键词：多酚；铜；催化活性层；内源性NO供体；NO释放；血小板；平滑肌细胞万方数据AbstractNitricoxide(N0)，amoleculeproducedbyendothelialcellsofthebloodvesselintima．hasbeenfoundtobeapotentinhibitorofplateletactivationandadhesion，aswellasaneriectiveinhibitorofsmoothmuscleproliferation．RecentresearchhasreportedthatbiomaterialsmodifiedbyNOd