高效工程菌的构建及其降解有机农药的研究进展.pptVIP

高效工程菌的构建及其降解有机农药的研究进展 一、简介 二、构建工程菌的方法 三、工程菌在降解有机农药污染物方面的应用 四、展望 一、简介 　 　农药在为农业生产提供高效杀虫、除草等性 能的同时,也带来了严重的环境污染。部分人工 合成有机化合物需要不同降解菌之间的协同代谢 或共代谢等复杂机制才能最终得以降解。如何将 分属于不同菌体中的污染物代谢途径组合起来, 构建具有特殊降解功能的工程菌,有效地提高农 药有机物的生物降解能力,是目前环境微生物领 域的研究前沿和热点。 二、构建工程菌的方法 1 、降解性质粒转移 2 、原生质体融合 3 、基因重组 1 、降解性质粒转移 将不同细胞的降解性质粒转移到一个受体细胞中,构建多质粒菌株,可以使一种微生物降解多种污染物或能完成降解过程中的多个环节。 Song等分离到一株以1 ,2 ,4 - 三氯苯(TCB) 为唯一碳源的施氏假单胞菌株THSL - 1 , 将其降解质粒pTHSL - 1 转化E. coliJM109 ,转化子不仅繁殖快,而且能高效降解土壤中残留的1 ,2 ,4 - TCB。 2 、原生质体融合 原生质体融合步骤包括： ①标记菌株的筛选和稳定性验证; ②原生质体制备; ③原生质体融合; ④原生质体再生; ⑤融合子验证、分离。 3 、基因重组 又称重组DNA 技术 主要过程: ①通过酶切消化,从供体细胞基因组中分离出目的性状的基因片段; ②将外源DNA 片段在体外通过连接酶连接到自我复制的、并具有选择记号的载体分子上,形成重组质粒分子; ③将重组质粒分子转移到适当的受体细胞中,使之在新的遗传背景下实现新的功能。 基因重组能大幅度提高降解酶活性,打破物种界限,加快变异速度,能定向选育、定向制备降解能力极高的工程菌株,其应用标志着现代遗传学已发展到能定向获得遗传性状的新阶段。 三、工程菌在降解有机农药污染物方面的应用 1、工程菌的降解性研究 有机农药污染主要由有机磷、有机氮和有机氯等造成 在有机磷降解方面, 筛选出一株能高效降解甲基对硫磷(MP) 的细菌HS - D36 ,在以MP 为唯一碳源的无机盐培养基上可以耐受800mg/L 的MP ,在LB 培养基上可耐受2000mg/ L的MP ;同时克隆了甲基对硫磷水解酶基因mpd ,并在E. coli 中获得高效表达,重组甲基对硫磷水解酶粗酶液活性达到52. 5U/ mL 。 阿特拉津是一种广泛使用的有机氮除草剂. 以模式菌株假单胞菌ADP 为供体,通过质粒转移,培育并筛选出两株高效、快速降解阿特拉津的菌株AD3 和AD25。它们能以阿特拉津为唯一氮源生长,降解速率和降解率都远高于ADP 菌株,能将培养基中500mg/ L 的阿特拉津在72h 内降解95 %以上 2009-08-05 11:34:04　来源: 网易探索(广州)　跟贴 0 条 手机看新闻 有没有办法让残留在水果蔬菜里的农药消失？科学家们想出了一个办法：让细菌“吃”了他们。而这种“吃”农药的细菌就是基因工程菌，它被植入了能分解有毒物质的特定基因。 让细菌完成任务就“自杀”：具体的说就是通过基因工程技术，将诱导自杀元件转入基因工程菌的细胞内，这一元件就是一个可控制的自杀系统，在一定条件下让细菌失去活性而死亡。 据美国物理学家组织网2011年8月18日报道，新加坡的研究人员日前培育出一种经过基因修改的大肠杆菌，这种基因工程菌能够识别并通过“自爆”的方式杀灭对人体有害的绿脓杆菌。相关论文8月16日在线发表在《分子系统生物学》（Molecular Systems Biology ）杂志上。 2 、工程菌固定化方面的研究 为提高工程菌的实际应用价值,防止其在使用中流失而导致去除效果下降,人们对工程菌的固定化进行了研究用固定化工程菌与传统活性污泥法串联工艺,实现了对高浓度高负荷阿特拉津废水的生物强化处理,没有出现工程菌大量流失的现象,在固定化颗粒表面及浅层均观察到大量菌体,颗粒表面还出现了生物膜和菌胶团。 四、展望 虽然工程菌在降解有机农药污染物方面显示出极大优越性,但由于构建方面的技术问题和应用中的生态安全性等问题,将研究成果用于实际工程还很有限. 为促进高效工程菌降解农药技术的推广,未来的研究重点应集中于以下几个方面: ①通过多途径多方法分离和筛选具有高效降解有机农药特性的菌株,建立高效降解菌的基 因库; ②利用基因工程技术定向选育遗传工程菌株并构建高效农药工程菌,拓宽降解谱,提高降解能力; ③加快有机农药降解酶的酶学研