人教版高中生物选修三专题11-1DNA重组技术的基本工具共24张PPT.ppt

基因工程的概念 1、概念：基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗的说就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改造生物的性状。 例1：科学家们经过多年的努力，创立了 一种新兴生物技术——基因工程，实施该 工程的最终目的是 A. 定向提取生物体的DNA分子　　　　　 B. 定向地对DNA分子进行人工“剪切” C. 在生物体外对DNA分子进行改造　　　 D. 定向地改造生物的遗传性状 ②平末端 二、“分子缝合针”——DNA连接酶 　 例5、某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图2为某家庭病的遗传系谱。 下列叙述错误的是 A. h基因特定序列中Bcl 1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果 B. II-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲 C.若II-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为XHXh D. II-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2. 【答案】D 三、“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体 1、作用：将目的基因导入受体细胞 2、常用运载体：质粒 动植物病毒 噬菌体 3、特点： （1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 （2）具一种或多种限制酶的切割位点，以便与外源基因连接 （3）具有某种标记基因，便于进行筛选 例7、ada（酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D. 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 【答案】C 例8、在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ） A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组DNA分子导入原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 小结 * * * * * * * * 专题1-1 2、DNA 重组技术的基本工具 “分子手术刀” ──限制酶 “分子缝合针” ──DNA连接酶 “分子运输车” ──运载体 D 使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（切割DNA分子） 原核生物（微生物） 1、来源： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 一 、“分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 黏性末端 平末端 2、特点：具有专一性 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并且能在特定的切点上切割DNA分子 ①黏性末端 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 限制酶 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 例2.下列有关基因工程中限制酶的描述，错误的是 A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧苷酸序列 B.限制酶的活性受温度的影响 C.限制酶能识别和切割RNA D.限制酶可从原核生物中提取 C 例3：同一种限制酶切割成的黏性末端是 A. ①② B. ①③ C. ①④ D. ②③ A 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性(平)末端，然后让两者的黏性(平)末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 思考? 1、作用: 把切下来的DNA片段拼接成新的DNA，即将脱氧核糖和磷酸连接起来. 2、作用原理： 催化磷酸二酯键形成 3、类型： 类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 功能 大肠杆菌 T4噬菌体 恢复 磷酸 二酯键 只能连接黏性末端 能连接黏性末端和平末端(效率较低) 相同点 差别 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， E·coli DNA连接酶　　　　　　　　或T4DNA连接酶 即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 T4DNA连接酶 相同点 区别 DNA连接酶 DNA聚合酶 寻根问底