人教版高二生物必修1实验：生物组织中的糖类，脂肪和蛋白质的鉴定课件共16张PPT.ppt

四、实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 实验原理： 化学试剂+有机化合物→特定的颜色 可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。 CH2OH–(CHOH)4–CHO+2Cu(OH)2 → CH2OH–(CHOH)4–COOH+ Cu2O↓+ 2H2O （葡萄糖） （浅蓝色） （葡萄糖酸） （砖红色） 即：还原糖中的醛基（–CHO）被Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原成砖红色的Cu2O沉淀 1.还原糖的鉴定原理： 还原糖+斐林试剂——砖红色沉淀 还原糖：可被氧化充当还原剂的糖。 常见的有：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖 注：蔗糖不是还原糖 还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 使用方法： 先混合再加入糖中（ NaOH+CuSO4） 水浴 加热 斐林试剂： 甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂(现配现用) 甲液：0.1g/ml的NaOH溶液， 乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液 （3）步骤： 样液制备（取材5g，加入石英砂和5ml水）→取样液2ml于试管中→加入新配制的斐林试剂1ml（甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色） 浅蓝色 水浴加热前后的颜色变化： 棕色 砖红色 2.蛋白质的鉴定原理： 蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。 蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性溶液（即A液可造成碱性环境）中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色络合物。 蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色 双缩脲试剂： A液：0.1g/mL的NaOH溶液 B液：0.01g/mL的CuSO4溶液 使用方法： 先加A液于样液中， 再加B液于样液中 （1）选材：鸡蛋清（必须稀释） （2）试剂：双缩脲试剂 A液：0.1g/mL的NaOH溶液， B液：0.01g/mL的CuSO4溶液 （3）步骤： 试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL（造成碱性环境），摇匀→加双缩脲试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色） 注：①样液浓度不宜过高，以免实验后黏住试管壁，洗不干净。 ②B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而掩盖生成的紫色。 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 鉴定物质 添加顺序方法 反应原理 反应条件 反应现象 比较斐林试剂和双缩脲试剂 0.1g/mL的NaOH溶液 0.1g/mL的NaOH溶液 0.01g/mL的CuSO4溶液 0.05g/mL的CuSO4溶液 还原性糖 蛋白质 甲液和乙液等量混合均匀后再加入 先加双缩脲试剂A液1mL，摇匀，再加双缩脲试剂B液4滴 50-65℃水浴加热 砖红色沉淀 紫色络合物 不需加热，摇匀即可 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原成Cu2O 具有两个以上肽键的化合物在碱 性条件下与Cu2+反应生成络合物 3.脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ→红色 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤 ①取材： 取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮 ②制作徒手切片：（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ③染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染液在切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精（苏丹Ⅲ易溶于酒精中，避免影响实验结果） ④制作装片：滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片 ⑤镜检鉴定：光学显微镜对光→低倍镜寻找着色圆形小颗粒→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒 4、 用试管取2mL待测组织样液，向试管内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化。 淀粉 + 碘→蓝色 加1~2滴碘液 鉴定物质 材料 试剂 现象 可溶性还原糖 梨 （避免颜色干扰） 脂肪 花生 蛋白质 豆浆 鸡蛋清 淀粉 马铃薯 生物组织中几种有机物的检测方法比较： 斐林试剂 （甲液乙液混合使用现配现用） 砖红色沉淀（水浴加热） 苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 橘黄色脂肪滴 红色脂肪滴 双缩脲试剂 (先加A液后加B液、 B液不能过量) 紫色 碘液 蓝色