天然小分子化合物对肠癌及胶质瘤细胞的抗肿瘤作用及潜在机制研究-药理学专业论文.docx

浙江大学博士学位论文致谢致谢时光匆匆，五年时光荏苒而过。千万分感谢我的导师连晓媛教授对我所有的指导与帮助，老师说‘有目标、沉住气、踏实干’，彻底打消了我浮光掠影、蜻蜓点水的学--j态度。连老师严谨的治学态度、不懈进取的科研精神、敏捷的思维、分析问题与解决问题的能力是我一生学习和借鉴的榜样。在此，谨向连老师致以最衷心的感谢与最崇高的敬意!感谢浙江大学海洋学院张治针教授对我的悉心指导和帮助，并提供研究化合物!感谢杨波教授、吴永江教授、周长新副教授、栾连军副教授、黄佩芳老师、刘伟老师、季湘铭老师及学院其他领导和老师给予的指导、关心和帮助。感谢本实验室童莹慧师姐、韩鸿璨师姐在我初入实验室时悉心教我实验技术；感谢宋宇宁博士在开展课题方面的协助；特别感谢张艳花、谢昕在裸小鼠皮下移植瘤模型中的协助及郑国湾在蛋白分析方面的协助。感谢实验室的兄弟姐妹徐康宁、沈璐、乔慧、樊银华、梁新媛、郭欣、叶雪威、虞斯然、张宇奋、朱月、李月月、吴刚、陈金龙、凌鹏、周倩等，你们的鼓励与帮助，使我有勇气克服所有困难。有你们风雨兼程，真的很幸福!真诚感谢浙江大学、浙江大学药学院，求是精神、明德弘药的思想打造了我的信念，这所‘拒绝喧嚣、拒绝浮躁’的学校提供给我的不仅是一流的实验平台，浙大的求是信念将会是我一生宝贵的精神财富。还有一些无法一一列举的师长及友人给予我帮助与指导，在此一并表示衷心的感谢。最后感谢我的家人对我的鼓励支持及不求任何回报的付出，你们永远是我最坚实的后盾与最温柔的港湾。浙江大学博士学位论文致谢11浙江大学博士学位论文前言前言肿瘤是一类世界范围内严重威胁人类健康的最常见、最严重也最难治疗的疾病之一。因为人类的生存环境、生活习性改变及其他众多不良因素，肿瘤的发病率依然在逐步上升，世界卫生组织(WorldHealth Organization，WHO)统计2008年全世界范围内新增肿瘤(不包括非黑色素瘤皮肤癌)人数为1270万人，同年因为肿瘤死亡的人数约为760万人。尽管二十一世纪医学技术得到极大发展，肿瘤仍被认为是对人类健康造成严重威胁疾病的首位，肿瘤治疗是现代医学研究中最为活跃的领域之一，化学药物治疗依然是肿瘤治疗的重要手段。在肿瘤治疗中发展最快的是药物治疗，进入二十一世纪以来，抗肿瘤药物的研制与开发已经进入到一个新的阶段，肿瘤靶向治疗的药物快速发展并迅速转化为临床实践，二十世纪末肿瘤临床的靶向治疗药物只有两三种，现已增加到约20 种【11。癌症是一类多病因、多因素相互作用的复杂疾病，肿瘤的发生、发展与多种因素复杂相关，并受多种信号通路的共同调控，虽然现有的分子靶向治疗药物为癌症的治疗开辟了新的途径，但是这些药物多数是针对单一靶点，当肿瘤细胞的某一靶点出现问题时，会代偿性的使用其它通路或靶点进行调控，单一靶点的药物并没有很好地临床疗效。因此，研制作用于肿瘤多靶点的药物会成为肿瘤治疗的新策略。肿瘤是一类复杂的异质性疾病，其能量代谢方式亦是错综复杂。肿瘤细胞的糖、脂肪和蛋白质的代谢方式与正常细胞相比均存在一定程度的改变，近年来，以糖酵解、氨基酸或葡萄糖代谢的关键酶或分子为靶标的肿瘤分子靶向研究已经取得了一些成果，并具有广阔的临床应用前景。肿瘤的能量代谢异常尤其以糖代谢的异常为主要的特征，早在1927年，德国生化和生理学家Warburg就发现肿瘤细胞即使在氧气充足的情况下，也依然优先进行糖酵解，称之为“有氧糖酵解”，也称为“瓦伯格效应”121。瓦伯格效应与肿瘤细胞适应快速分裂进行细胞增殖所需111浙江大学博士学位论文要的物质合成有关。近年来，以肿瘤细胞糖酵解过程中的关键酶或载体为靶点对各种恶性肿瘤进行体内外治疗取得了积极进展。6．磷酸果糖激酶．2／果糖双磷酸酶．2同工酶3(PFKFB3)及乳酸脱氢酶(LDH)，是肿瘤细胞糖酵解过程中起关键调节作用的酶，在肺癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌、胰腺癌和卵巢癌等很多癌症细胞中均高水平表达，与肿瘤的关系十分密切，在肿瘤细胞发生、发展、能量代谢、细胞增殖、细胞凋亡、细胞自噬及肿瘤血管生成等过程中均起着十分重要的作用13-91。本研究发现，受试药物ZZZ．1具有显著而稳定的抗胶质瘤疗效，可靶向糖酵解过程中的关键酶PFKFB3及LDH诱导胶质瘤能量代谢方式转变，促进细胞凋亡及衰老，诱导胶质瘤细胞向正常细胞分化并抑制肿瘤实体瘤的血管新生，在动物及细胞实验中均可显著抑制胶质瘤生长。肿节风(Sarcandraglabra)为金粟兰科植物草珊瑚的干燥全株，近年来肿节风片与肿节风注射液联合用于消化道癌、胰腺癌、肝癌等肿瘤治疗，取得了一定的临床疗效。咖啡酸3,4．二羟基苯乙酯(CADPE)是从中药肿节风中提取的一类天然多酚酯类化合物，天然多酚类化合物如姜黄素(Curcumin)及咖啡酸苯乙酯(CAPE)多具有抗炎、抗氧化功能，并有很强的抗