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G显带法用于X光医生染色体断裂点分布的研究 中国医学科学院放射医学研究所 王 芹 * 报告内容 一、前言 二、材料和方法 三、结果 四、讨论 * 一、前言 在度量电离辐射所引起的生物机体量效关系和评估危害程度的方法中，染色体畸变分析应用最早、发展最为成熟，广泛应用于辐射效应研究。目前由于细胞遗传学研究手段的制约，通常只能对几个染色体进行分析，然后根据所得的结果外推至整个基因组，即必须假定所分析的染色体能够代表整个基因组，也就是说染色体断裂在整个基因组是随机分布的。G显带方法能较准确地对染色体各个畸变断裂点加以定位, 判定染色体细微结构的变化。本文应用G显带方法对X光医生染色体畸变断裂点的分布进行了分析。 * 二、材料和方法 1. 实验对象 X线组37人，均为男性，年龄范围38~67岁，平均55岁，平均放射工龄28年， 参加工作的起始年限为1951~1979年。对照组10人，为相同医院中同时期、同性别、同年龄范围，但不接触X射线的医务人员。 2. 细胞培养和制片 肝素抗凝的外周血0.5ml接种在4.5ml含15%小牛血清、适量抗生素和PHA的RPMI1640培养基中，置5%CO2培养50小时，终止培养前6小时加入终浓度为0.12?g/ml秋水仙素。终止培养后用0.075mol/L KCL低渗处理15min，甲醇：冰醋酸（3:1）固定，制片。 * 二、材料和方法 3. G-显带 选择分散良好的中期相标本置60℃ 干燥箱干燥4小时，然后用含有EDTA的0.05%胰酶处理，Giemsa染色。 4. 畸变分析 选择带型清楚和分散良好者镜下直接分析,每例分析100个中期相，有异常或怀疑有异常者显微摄影、剪贴、组型。 5. 统计处理 分析标准按照国际命名体系测定断裂点的分布，预期值采用Morton提供的每条染色体的相对长度值计算，然后对数据进行χ2检验，分析观察值与预期值差异的显著性。 * 三、结果 1. X射线组 分析37名X光医生G显带中期分裂细胞3545个，共有断裂点146个，其分布见表1，统计学处理观察值和预期值有非常显著性差异（χ2=42.82，df=23, P0.01），X线组染色体畸变断裂点呈非随机分布。对每条染色体分别加以比较，发现第7号和14号染色体的断裂点数目观察值比预期值高（P0.05），在 7p13和14p11的位点断裂频率较高，各占其染色体总断裂的 16.67%和20% 。 * 表1 X射线组染色体断裂点分布 染色 体号 相对 长度 观察 值 预期 值 χ2 P 染色 体号 相对 长度 观察 值 预期 值 χ2 P 1 8.29 8 11.78 1.21 n.s 13 3.44 6 4.89 0.25 n.s 2 7.87 7 11.18 1.56 n.s 14 3.37 10 4.79 5.67 0.05 3 6.72 11 9.55 0.22 n.s 15 3.25 6 4.62 0.41 n.s 4 6.28 4 8.92 2.71 n.s 16 3.11 2 4.42 1.33 n.s 5 5.97 9 8.48 0.03 n.s 17 2.92 4 4.15 0.01 n.s 6 5.66 13 8.04 3.06 n.s 18 2.71 1 3.85 2.11 n.s 7 5.30 18 7.53 14.56 0.05 19 2.15 0 3.06 3.06 n.s 8 4.75 7 6.75 0.01 n.s 20 2.27 1 3.23 1.54 n.s 9 4.48 11 6.37 3.37 n.s 21 1.62 2 2.30 0.04 n.s 10 4.60 5 6.54 0.36 n.s 22 1.80 2 2.56 0.12 n.s 11 4.56 4 6.48 0.95 n.s X 5.27 7 7.49 0.03 n.s 12 4.43 6 6.30 0.01 n.s Y 1.92 2 2.73 0.20 n.s ? ? ? ? ? ? 合计 102.74 146 146.01 42.82 ? * 三、结果 2.对照组 分析10名对照人员G显带中期分裂细胞908个，共有断裂点17个，其分布见表2，未发现断裂点多发的染色体，统计学处理观察值和预期值无显著性差异(p0.05)。 * 表2 对照组染色体断裂点分布 染色 体号 相对 长度 观察 值 预期 值 χ2 P 染色 体号 相对 长度 观察 值 预期 值 χ2 P 1 8.29 2 1.37 0.29 n.s 13 3.44 1 0.57 0.32 n.s 2 7.87 0 1.30 1.30 n.s 14 3.37 1 0.56 0.3