临床基因扩增检验质量保证(ppt97).pptVIP

质控规则的表达方式 通常质控规则以符号AL来表示，其中A为质控测定中超出质量控制限的测定值的个数，L为控制限，通常用均值或均值±1～3SD来表示。 当质控测定值超出控制限L时，即可将该批测定判为失控。 常用的13S质控规则，其中1为原式中的A，3s为原式中的L，表示均值±3s，其确切的含义为：在质控测定值中，如果有一个测定值超出均值±3s范围，即可将该批测定判为失控。 * 质控规则的功能 简单地说就是用于判断测定批的失控还是在控 。 当整个质控过程中使用同一个质控物时，可用来判断单个或多个测定批内该质控物的测定值是否失控； 当整个质控过程中使用两个或两个以上的不同的质控物时，可用来判断同一或多个测定批内的两个或两个以上的质控物的测定值是否失控。 * 常用质控规则的符号及定义 符 号 定 义 12S 一个质控测定值超出±2s控制限。 13S 一个质控测定值超出±3s控制限。 22S 两个连续的质控测定值同时超出+2s或－2s控制限。 R4S 同一批测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的 差值超出4s控制限。 31S 三个连续的质控测定值同时超出+1s或－1s控制限。 41S 四个连续的质控测定值同时超出+1s或－1s控制限。 7X 七个连续的质控测定值同时处于均值（）的同一侧。 7T 七个连续的质控测定值呈现一个向上或向下的趋势变化。 8X 八个连续的质控测定值同时处于均值（）的同一侧。 9X 九个连续的质控测定值同时处于均值（）的同一侧。 10X 十个连续的质控测定值同时处于均值（）的同一侧。 * Levey-Jennings质控图方法 也称Shewhart质控图，是由美国的Shewhart于1924年首先提出，并用于工业产品的质量控制。后来（二十世纪五十年代初），Levey-Jennings将其引入临床检验的质量控制 。经Henry和Segalove的改良，即为目前常用的Levey-Jennings质控图。 * 质控图 * 质控图 * Levey-Jennings质控图基本的统计学含义 稳定条件下，在20个IQC结果中不应有多于1个结果超过2SD（95.5%可信限）限度；在1000个测定结果中超过3SD（99.7%可信限）的结果不多于3个。 如以±3s为失控限，假失控的概率为0.3%。 * 质控图的记录的其它方面 IQC数据是用来控制实际过程的，因此其表达应清楚和直接，在质控图上记录结果时，应同时记录测定的详细情况，如日期、试剂、质控物批号和含量及测定者姓名等。 * 测定前质量控制 实验室设施、仪器设备及管理 理想的试剂和操作方法 人员培训 * 实验室设施、仪器设备及管理 临床基因扩增检验实验室应有充分合理的空间、良好的照明和空调设备 ； 实验室仪器设备应保养良好，实验用品要达到相应的要求。加样器的校准？带滤塞吸头的使用及质检？离心机？热循环仪？水浴箱和/或恒温干浴仪？酶标仪和洗板机？ * 基因扩增仪器设备的质控 * 带滤塞吸头的使用及质检 首先制备一个含1～2%甘油及色素（如甲基橙）的水溶液，如果吸头的最大体积为100μl，则将加样器吸取体积调至110～120μl，再套上吸头后吸取上述有色液体。如果吸头质量好，则有色液体不应出现在滤塞之上，否则说明滤塞不严。 * 带滤塞吸头的使用及质检 用实验来检验带滤塞吸头的质量：先纯化制备数份强阳性和数份阴性核酸标本，然后将加样器吸取量设至扩增加样所需的体积，使用待评价带滤塞吸头对一份强阳性样本来回吸取10次（模拟10份阳性样本的吸取），将最后一次的吸取液加至一含扩增反应液的管中，之后，换一个新吸头，连续吸取10份阴性样本分别至10个扩增反应管中，此过程重复3～5次，最后对每一管按所用试剂方法进行扩增检测。强阳性样本应为强阳性，阳性弱或出现阴性则说明吸头可能含有扩增抑制物。所有阴性样本应为阴性，出现阳性则表明吸头不能有效地防止气溶胶对加样器的污染。 * 扩增仪孔间温度的重复性和均一性的检测方法 一是使用一种热电偶探针、微伏转换器和自动图示记录仪组成扩增加热模块孔内温度监测记录系统，当孔间温度变异超出1℃时，其可测出来。 具体做法是将装有TE缓冲液并上加石蜡油的扩增反应管放置于扩增仪各孔中，热电偶探针透过扩增反应管盖插至缓冲液中，然后按程序进行一个常规的PCR扩增，加热模块如为96孔，则至少要测定12孔不同位置孔内的温度，在整个扩增过程中，可移动热电偶探针至上述不同孔中监测温度，但每一孔内温度监测至少要有一个扩增周期。 * 扩增仪孔间温