鸵鸟血液中性粒细胞中抗菌肽的分离纯化及其抗菌抗病毒作用的研究-预防兽医学专业论文.docx

河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书学位论鸵鸟血液中性粒细胞中抗菌肽的分离纯化及学位文题目其抗菌抗病毒作用的研究级别农学硕士学生学科导师樊博预防兽医学康相涛姓名专业姓名学位论文如需保密，解密时间年月日是否保密独创性声明本人呈交论文是在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得河南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。特此声明。～。研究生签名：袋剪导师签名：』j：；≥：≥j眺沏缉f月中嗍矿琶，毋学位论文使用授权及知识产权归属承诺本人完全了解河南农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本：学校有权保存提交论文的印刷本和电子版本，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意河南农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人完全了解《河南农业大学知识产权保护办法》的有关规定，在毕业离开河南农业大学后，就在校期间从事的科研工作发表的所有论文，第一署名单位为河南农业大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河南农业大学所有，否则，承担相应的法律责任。注：保密学位论文在解密后适用于本授权书。l—jj习。●■H研究生签名：璞娉导师签名j{：二一：．学院领导签名：；‘!，，“●一日期：2。僻‘月21日日期矿辞舀妇日期：唾臼刁日致谢本论文是在导师康相涛教授悉心指导下完成的，从试验的设计和实施到论文的撰写和修改无不凝聚着导师的心血。他渊博的学识、严谨求实的治学态度、敏捷的科研思路、宽广的胸襟、诲人不倦的师德以及强烈的责任感和敬业精神深深地感染着我，并将使我终生难忘及受益匪浅。在此，谨向康老师致以崇高的敬意和衷心的感谢!在课题实施过程中，我要尤其感谢河南省家禽种质资源创新工程研究中心的所有教师，孙桂荣老师、田亚东老师、李国喜老师、韩瑞丽老师、李明老师、王彦彬老师，在论文的选题、技术路线的设计、实验技术问题的解决、结果的分析和论证以及论文的最终定稿等整个论文工作过程中给予了我悉心的指导和帮助。感谢河南省家禽种质资源创新工程研究中心2008届研究生梁敏、杨菊凤、白义春、高素敏、赵云航、张小强、李振华、赵高、与我一起度过三年的研究生学习生活：感谢已经毕业的师兄师姐刘记强、秦召、李朝云、宋善道、石建州、梅承君，蒋瑞瑞在试验设计、实施、论文撰写过程中提出很多宝贵的意见和建议；感谢师弟靳明明、李小轩、王晓可、刘凯、曹向阳、张立恒、黄煌、王润之；师妹张艳芳、亢娟娟、孙宜梅、李燕、王佳伟、马新红从各方面都给予我很大的帮助，并且共同创造一个良好的实验气氛，令人难忘。在毕业论文完成期间，深深地体会到河南省家禽种质资源创新工程研究中心全体师生的敬业和团体合作精神。感谢河南固始三高集团熊延宏老师；河南农业大学种鸡场王彦彬、罗志军、赖葆新等各位老师和员工；河南农业大学中心实验室黄晓书副主任；河南农业大学牧医工程学院陈丽颖老师，夏平安老师以及牧医工程学院的所有领导给予的支持和帮助；感谢牧医工程学院全体老师；感谢河南农业大学研究生处的各位老师；没有他们的帮助和支持，我的论文不可能顺利完成!感谢洛阳惠中兽药集团有限公司的刘兴金总工程师、技术部的张晓慧科长在试验过程中给予的帮助。正是以上各位老师及同学的大力支持和热情帮助才使我的试验得以顺利实施，在此深表谢意!最后，我要特别感谢我的家人多年来给予我生活上的关心、学业上的充分理解和精神上的鼓励；感谢所有关心和帮助过我的亲朋好友!河南农业大学2008届硕士研究生毕业论文中文摘要收集鸵鸟新鲜抗凝血，应用0．83％氯化氨溶液裂解至染色镜检无红细胞，低温离心，收集白细胞沉淀。将自细胞沉淀超声波破碎至染色镜检无完整细胞，低温高速离心提取细胞颗粒。10％醋酸溶液4C下搅拌萃取抗菌肽。低温高速离心收集上清液，真空冷冻干燥，用0．01％醋酸溶液溶解即为抗菌肽粗提物。应用离子交换层析法将抗菌肽粗提物初步分离成两部分即阴离子组分和阳离子组分。将阳离子组分用RP-HPLC法进行分离获得有抗菌活性的目的蛋白。应用SDS凝胶电泳方法检测目的蛋白的纯度，并初步测定其分子量，结果表明，抗菌活性产物分子量在4，700—4，980Da之间。粗提物抑菌试验结果表明，在鸵鸟中性粒细胞中存在天然抗菌物质，并表现出对金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)、大肠杆菌(革兰氏阴性菌)和真菌(白色念珠菌)较强的抑制作用。离子交换层析产物的抑菌试验结果表明，鸵鸟中性粒细胞中的抗菌物质是阳离子性质；主要作用于细菌，尤其是对金黄色葡萄球菌(革