绿盲蝽精氨酸激酶AK基因片段克隆及不同生境表达量研究-农学学报.PDF

中国农学通报 2017,33(33):27-33 Chinese Agricultural Science Bulletin 绿盲蝽精氨酸激酶(AK)基因片段克隆 及不同生境表达量研究 周旭凌，张未仲，李 捷，李庆亮，胡增丽，赵龙龙，刘朝红，尹 蓉，杜海燕 （山西省农业科学院果树研究所，太原030801） 摘 要：为了探讨不同生境对绿盲蝽生长影响，从分子角度确定绿盲蝽在果园的适合生境。采用绿盲蝽 专用诱芯调查了枣园、葡萄园的绿盲蝽发生量，并根据保守序列设计简并引物，克隆精氨酸激酶片段，荧 光定量PCR 检测了绿盲蝽成虫基因表达量。结果表明在枣园绿盲蝽的发生量始终高于葡萄园，枣园有 3 个发生高峰，而葡萄园有2 个。测序结果表明目的序列含有783 个核苷酸，可编码261 个氨基酸。序列 比对及进化树表明AL-AK 与其他昆虫AK 相比近似度85% 以上，且同半翅目昆虫较为靠近。枣园绿盲 蝽精氨酸激酶基因表达量低于葡萄园。以上结果说明枣园生境比葡萄园适合绿盲蝽的发育，为针对性 的防治绿盲蝽提供理论基础。 关键词：绿盲蝽；精氨酸激酶；枣园；葡萄园；荧光定量 中图分类号：S433.3 文献标志码：A 论文编号：cas ArginineKinase(AK)FragmentofApolyguslucorum(Meyer-Dür): CloningandExpressionfromDifferentHabitats ZhouXuling,ZhangWeizhong,LiJie,LiQingliang,HuZengli,ZhaoLonglong, LiuZhaohong,YinRong,DuHaiyan (PomologyInstitute,ShanxiAcademyofAgricultureScience,Taiyuan030801) Abstract: ThisstudyaimstoinvestigatetheeffectsofdifferenthabitatsonthegrowthofApolyguslucorum Meyer-Dür,andtodeterminethesuitablehabitatofApolyguslucorumMeyer-Dürintheorchardfromthe molecularlevel.WeusedspecialluretoinvestigatetheoccurrencecontentofApolyguslucorumMeyer-Dürin jujubeorchardandvineyard.Theprimersweredesignedaccordingtotheconservedsequence,clonedthe fragmentsofargininekinase.ThegeneexpressionofApolyguslucorumMeyer-Düradultwasdetectedby fluorescencequantitativePCR.TheresultsshowedthattheoccurrencecontentofApolyguslucorumMeyer-Dür injujubeorchardwasalwayshigherthanthatinvineyard.Therewerethreeoccurrencepeaksinjujube orchard,whiletwoinvineyard.Thesequencingresultsindicatedthatthetargetsequencecontained 783 nucleotidesandcouldencode261aminoacids.SequencealignmentandphylogenetictreeindicatedthatAL- AKhadasimilarityof 85%ormorecomparedwithother