植物中多胺含量超高效液相色谱法的建立-南京农业大学学报.PDF

－ 　 南京农业大学学报　 ２０１６ꎬ３９(３):３５８ ３６５ ｈｔｔｐ:/ / ｎａｕｘｂ.ｎｊａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＤＯＩ:１０.７６８５/ ｊｎａｕ.２０１５１１００５ － 林绍艳ꎬ张芳ꎬ徐颖洁. 植物中多胺含量超高效液相色谱法的建立[Ｊ]. 南京农业大学学报ꎬ２０１６ꎬ３９(３):３５８ ３６５. 植物中多胺含量超高效液相色谱法的建立 林绍艳ꎬ张芳ꎬ徐颖洁∗ (南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室ꎬ江苏 南京 ２１００９５) 摘要:[目的]植物体内的多胺对植物生长具有明显的促进作用ꎬ对体内抗逆能力的提高也具有重要意义ꎮ 本试验基于高效 液相色谱方法(ＨＰＬＣ)ꎬ探讨了超高效液相色谱法(ＵＰＬＣ)测定植物中内源多胺ꎬ如腐胺(Ｐｕｔ)、亚精胺(Ｓｐｄ)、精胺(Ｓｐｍ)的 含量ꎮ [方法]以小麦叶片、草坪草叶片作为试验材料ꎬ用液氮将其磨成粉末ꎬ加入冰预冷的５％(体积分数)高氯酸ꎬ涡旋混 匀ꎬ置于冰浴中浸提１ｈꎬ然后４ ℃、１５０００ｇ离心３０ｍｉｎꎬ吸出上清液放入新的离心管中ꎬ经过衍生以后ꎬ选用色谱柱ＡＣＱＵＩＴＹ × × ＵＰＬＣＨＳＳＴ (１００ｍｍ ２.１ｍｍ １.８μｍ)ꎬ进行多胺含量的测定ꎬ流动相为乙腈和水(体积比为４４∶５６)ꎬ柱温为３０ ℃ꎬ流速为 ３ －１ ０.４５ ｍＬｍｉｎ ꎬ等度洗脱ꎬ检测波长为２３０ ｎｍꎬ进样体积为２ μＬꎮ [结果]样品中的Ｐｕｔ、Ｓｐｄ和Ｓｐｍ保留时间分别为 １.２４、 －１ １.９９、３.１９ ｍｉｎꎬ样品中的多胺测定一次可在５ ｍｉｎ 内完全分离ꎻＰｕｔ、Ｓｐｄ和Ｓｐｍ在 １~１００ μｇｍＬ 范围内ꎬ线性关系良好ꎬ相 关系数分别为０.９９９ ３、０.９９９ １、０.９９９０ꎬ重复性和稳定性试验的相对标准偏差(ＲＳＤ)均小于２％ꎬ说明该测定方法快速、稳 定、分析精密度高ꎮ [结论]该试验方法简洁、快速、灵敏度高、重现性好ꎬ可有效测定植物中多胺的含量ꎬ为多胺在植物逆境 代谢途径中的研究提供了基础ꎮ 关键词:多胺ꎻ超高效液相色谱ꎻ小麦ꎻ草坪草 － － － 中图分类号:Ｓ５１２ꎻＳ６８８.４　 　 　 　 文献标志码:Ａ　 　 　 　 文章编号:１０００ ２０３０(２０１６)０３ ０３５８ ０８ Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ＵＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ ＬＩＮ ＳｈａｏｙａｎꎬＺＨＡＮＧ ＦａｎｇꎬＸＵ Ｙｉｎｇｊｉｅ∗ (Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｃｒｏｐ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｒｍ