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2018-05-06 发布于四川
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菌种选育技术22728h.ppt

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《微生物工艺技术》菌种选育与保藏技术② 3、诱变育种技术实例（三）杂交育种 ? 杂交育种是指将两个不同性状个体内的遗传基因通过接合、转化、转导等转移到一起，经过遗传分子间的重新组合，形成新遗传型个体的方式，又称基因重组或遗传重组。 ? 微生物杂交育种的一般程序（四）原生质体融合技术 ? 所谓原生质体融合（protoplast fusion）就是将两个亲本的细胞壁分别通过酶解作用加以瓦解，使之形成原生质体，然后在高渗条件下，并加予物理、化学或生物的助融条件，使两个亲本的原生质体相互凝集和发生融合的过程。 ? 原生质体融合基本过程 * * * * 谷氨酸高产菌株的诱变选育？出发菌株前培养菌悬液制备 60Co诱变平板分离斜面摇瓶初筛 60Co诱变株前培养菌悬液制备 NTG诱变平板分离斜面摇瓶初筛复筛稳定性试验选出菌株出发菌株天津短杆菌T6-13 前培养液体培养基摇瓶培养6~8h 菌悬液制备无菌水稀释 108个/mL 60Co诱变 60Co照射致死曲线选定 500Gy 作为 60Co 诱变剂量单位物质吸收的能量称为吸收剂量。其计量单位为戈瑞（Gy）：即是每千克物质中吸收1焦耳的能量（J/kg）。 Gy 是什么？平板分离稀释涂布平板培养挑取100株以上斜面培养如何挑取菌落？平板使用定性培养基如何挑取菌落？添加显色剂添加碳酸钙添加谷氨酸结构类似物添加维生素 P类衍生物抗性株：细胞膜通透性好抗性株：解除反馈抑制备份斜面摇瓶初筛斜面发酵培养基摇瓶发酵检测谷氨酸浓度选出5~10株 60Co诱变结果 60Co诱变株 NTG诱变 NTG 0.02% 选定30min 平板分离摇瓶筛选 NTG诱变结果稳定性试验传代10次