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HIV 临床检测技术进展及应用 甘肃省疾病预防控制中心 性病艾滋病检测实验室 乔瑞娟 2011-04-15 HIV检测项目 HIV抗体检测 HIV抗体检测的用途 诊断（确定个体HIV感染状况） 监测（了解不同人群HIV感染率及其变化趋势） 血液筛查（防止输血传播HIV） ELISA原理 WB原理 新近感染检测 新近感染检测的用途 疫情的评估 干预措施的评价 BED- CEIA原理 HIV-1 p24抗原检测 HIV-1 p24抗原检测的用途 HIV- 1抗体不确定时或窗口期的辅助诊断 HIV- 1抗体阳性母亲所生婴儿的早期辅助鉴别诊断 第四代HIV- 1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性但HIV- 1抗体确认阴性者的辅助诊断 HIV RNA定量检测 HIV RNA定量检测的用途 辅助诊断HIV感染 监控病程 指导治疗方案 判定疗效 预测疾病进展 HIV RNA定量检测 HIV RNA定量检测的方法 CD4+ T淋巴细胞计数 CD4+ T淋巴细胞计数的用途 了解机体的免疫状态以确定疾病分期 监测疾病进程 评估疾病预后 制定抗病毒治疗方案及机会性感染预防性治疗方案 评估抗病毒治疗疗效 CD4+ T淋巴细胞计数方法 HAART耐药检测 HAART耐药检测的用途 提示不应再使用哪些药物 避免太早换药或使用不再有效的药物的成本损失 避免无效药物的毒性 避免耐药性的进一步发展 基因型分析的优点和缺点 优点 可快速完成（数天） 相对低成本（﹩100-﹩400） 许多实验室都能完成 缺点 并非直接测量敏感性 有时难以对结果进行解释 并非所有耐药突变的模式都已知（尤其对于新药和组合） 一般都是定性结果 是对混合毒株的检测 表型分析的优点和缺点 优点 直接测量药物敏感性 定量的 可直接检测新的RT和PR抑制剂 缺点 耗时长（数周） 技术复杂 比基因型成本高 能开展检测的实验室少 HIV分离 HIV分离的用途 HIV- 1感染者的辅助诊断 HIV- 1抗体阳性母亲所生婴儿的早期辅助鉴别诊断 HIV 临床检测术技进展及应用 如何在提高检测灵敏度、特异度的同时，达到检测快速、操作自动化和降低成本的目的，满足临床需求，更好服务于国家的AIDS防治工作，将是HIV临床检测技术的未来研究方向。 * * * * HIV抗体 新近感染 HIV-1 p24抗原 HIV RNA定量 CD4+ T淋巴细胞 HAART耐药检测 HIV分离 HIV抗体检测 筛查实验 ELISA 凝集法 层析法 确认实验 WB 条带免疫 放射免疫 沉淀 免疫荧光 固相期 人体样本 结合 Y Y 1st gen 2nd gen Y 3rd gen Y Y 4th gen Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y 抗原 IgG抗体 P24抗原 Y Y Y Y Y IgM抗体 E:酶 新近感染检测 血清抗体阳转前 HIV p24抗原 核酸 血清抗体阳转后 血清学 亲和性 紧密性 抗HIVp31 BED- CEIA 。。。。。。 。。。。。。 1 分枝DNA信号放大系统（bDNA） 2 3 4 逆转录PCR系统（RT-PCR） 核酸序列扩增系统（NASBA） Easy-Q法 粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 耐药分析类型 基因型分析检测： 基于序列预测表现 表型检测： 测定特定药物的敏感性 重组分析： 病人毒株进行RT/PCR后转染进载体 PBMC分析： 病人毒株直接培养 基因型分析的步骤 样本病毒 提取RNA cDNA 合成(RT) cDNA 扩增 (PCR) 电泳 数据分析(base calling) 报告 (序列, 突变,解释) 测序反应 阳性及隐性对照 阳性对照 表型分析的步骤 样本病毒 提取RNA cDNA 合成(RT) cDNA 扩增 (PCR) 假病毒 药物敏感性检测 耐药性检测载体 载体组装 转染