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酵母蔗糖酶的分离提取 作者：XX 指导老师：XX 摘要：采用自溶法从酵母中提取蔗糖酶，即在一定PH和适当的温度下，利用组织细胞内自身的酶系统将细胞破碎蔗糖酶在畜牧方面，可防治禽兽的疾病，促进幼龄禽兽的发育，节约饲料和提高肉产量等；在农业方面可防治植物病害、刺激植物生长、提高作物产量；在工业上可用作鱼、肉、蔬菜和水果等食品的保鲜剂NaOH，蒸馏水，PH=4.7缓冲液，DNS试剂，0.9%NaCL，考马斯亮蓝G-250，系列标准蛋白液，150mol/L 磷酸等。 1.2器材 离心机，722分光光度计，水浴锅，量筒25ml，烧杯100ml，大小试管若干，各种专用移液管，吸耳球，玻离棒，胶头滴管，PH试纸等。 1.3操作方法 1．3.1蔗糖酶粗品制备方法 (1)自溶法 将5g酵母粉倒入500mL烧杯中、少量多次的加入15mL蒸馏水，搅拌均匀，成糊状后加入0.5g乙酸钠、8mL乙酸乙酯，搅匀，盖好，于35℃恒温水浴中搅拌30min。 (2)抽提 补加蒸馏水10mL，搅匀，盖好，于35℃恒温过夜，4000r/min 离心10min,弃沉淀，得E1;量体积V1=17.5mL,取出2mL置于4℃冰箱保存，待测酶活力及蛋白质浓度(留样1)。 （3）乙醇分级和透析 测E1 pH：用10%HAC调pH至4.5（注意少量、慢加、搅匀，防止调过），共加入0.5ml 10%HAc; （a）’