转基因动物的技术路线.ppt

二、转基因动物技术的主要步骤 获取外源目的基因 外源目的基因导入生殖细胞或胚胎干细胞 选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统和宿主动物 转基因胚胎的发育及鉴定 筛选所得的转基因动物 三、?转基因动物的技术路线 经典的技术路线? 目的基因 显微注射?已交配的 取出 移植 受体动物 妊娠供体动物 受精卵 输卵管 转基因动物 缺点：注入目的基因的命中率低，目的基因的整合率低，受精卵移植的受孕率低。 ?转基因动物的技术路线(续) ?整合胚胎移植的技术路线 转基因动物 受体动物子宫  目的基因 非手术 胚胎移植? 体外受精 体外培养 多细胞胚胎 检测 整合外源基因卵子 受精卵 或囊胚 的胚胎精子优点：受精卵的成活率高达90％以上，外源基因整合率高，提高受孕率。 ?转基因动物的技术路线（续） 核移植（克隆）的技术路线 目的基因 转基因动物? 导入? 动物胎儿成纤维细胞 妊娠  取核?动物 去核 重组的 体外培养 囊胚期 胚胎移植 卵细胞 受精卵 胚胎 受体动物子宫? 特点：体细胞核移植；核移植前导入目的基因。 ?转基因动物的技术路线（续） 整合卵受精的技术路线：? 目的基因 转基因动物  导入  逆转录病毒 妊娠  精子 感染  体外受精 胚胎移植  卵母细胞 成熟卵细胞 囊胚 受体动物子宫 ?特点：卵母细胞导入目的基因后再与精子受精。 四、目的基因的制备和转基因的方法 目的基因的制备·目的基因的获得 逆转录合成法 化学合成法 PCR扩增法·目的基因的扩增 通过载体在宿主中克隆 通过PCR扩增目的基因 转基因动物的方法 · 显微注射法 · 生殖细胞载体法 · 胚胎干细胞法 · 病毒载体法 * * * * * * （一）用于提高动物生长速度 （二）用于改善畜产品的品质 （三）用转基因的动物生产药物 （四）用转基因动物作器官移植的供体 （一）用于提高动物生长速度 导入外源生长激素基因 （二）用于改善畜产品的品质 举例说明 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大减低。 （三）用转基因的动物生产药物 设问:就基因药物而言，最理想的表达场所是哪里？ 转基因动物的乳腺。 （1）乳腺是一个外分泌器官，乳汁不进入体内循环，不会影响转基因动物本身的生理代谢