微生物工程---发酵培养基的优化.pptVIP

灵芝胞外多糖深层发酵培养基的优化瑚珊 培养基主要成分 菌种 灵芝(Ganoderma lucidum) 碳源:葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、术糖，酒糟；玉米粉。 氮源:麸皮、豆饼粉,酵母营、蛋白胨、尿素、硫酸铵 实验方法 种子培养 1)斜面培养基PDA． 2)液体种子培养基(g／L)：葡萄糖20；玉米粉10；麸皮5;KH2PO4 1．5；MgSO4 2．5． 3)液体种子培养：将斜面菌种转接到250 mL三角瓶，装液量80 mL．30℃和150 r／min条件下培养7 d．以10%的接种量转到500mL三角瓶中培养3～4 d作为发酵罐接种物。 深层发酵 25 L发酵罐中培养基体积12．5 L，发酵温度30℃，通风量：0．75 m3／h，搅拌转速180 r／min，接种量1．25 L，发酵时间96 h． 细胞干重法测定生物量．按下式计算生物量(g／L)： 生物量= (DCW／V)×106 ．式中DCW 为细胞干重(g);为取样体积(mL)． 乙醇沉淀法测定粗多糖 营养性因子对灵芝多糖深层发酵的影响 碳源 葡萄糖及成分较复杂的复合碳源(玉米粉及酒糟)有利于苗丝体的生长和胞外多糖的分泌。其原因可能来自两方面，一是酒糟等碳源中含有的其它营养成分(各种维生素类等)有利于菌体的生长；二是酒糟中含有的纤维素、半纤维素和核苷酸类物质作为菌丝体胞外多糖合成的前体诱导物而促使胞外