第五章 酶工程幻灯片.pptVIP

酶可使清洁燃料的梦想变为现实 成功的饲料用酶，如植酸酶可减少向环境中排放磷 纺织精炼用酶 洗涤剂酶 酶增强牙膏的洁净能力 使用酶生产没有反式脂肪酸的食用油和奶油 提高啤酒质量 酶替代面包中的乳化剂、改善面包质量、延长保鲜期 改善面条的咬劲，增白、增亮、护色，提高面条的耐煮性并降低黏度等 烘焙工业用酶 用酶处理皮革可减少化学品的使用 促进草皮生长的产品 酶与人类的生活 酶在淀粉加工中的应用 淀粉 麦芽寡糖酶 低聚麦芽糖 低聚异麦芽糖 淀粉酶、葡萄糖苷转移酶 酶在面粉烘烤加工中的应用 增大面包体积、改善面包表皮色泽、改善面粉质量、延缓老化、提高柔软度、延长保存期。如淀粉酶、蛋白酶、脂肪氧化酶、乳糖酶 酶在蛋白质加工中的应用 蛋白酶提高和改善蛋白质溶解性、乳化性、起泡性、黏度和风味。 嫩肉晶： 木瓜蛋白酶 酶在食品保鲜中的应用 葡萄糖氧化酶（抗氧化） 酶法生产L-氨基酸 酶法生产高果糖浆 淀粉 酶 葡萄糖 果 糖 异构化 酶在乳品加工中的应用 乳糖酶分解乳糖、凝乳酶制造干酪、添加溶菌酶消毒杀菌、生物传感器测定乳糖含量、脂肪酶有助于乳品增香 酶在果蔬加工中的应用 果胶酶（提高果汁澄清度、增加产汁率、降低黏度、提高 过滤效果）、纤维素酶、葡萄糖氧化酶（果汁脱氧化） 所以，载体的选择非常重要，通常采用载体加“臂”的方法 低聚麦芽糖具有生物功效，高能量，易消化、低甜度、低渗透， 氨基酸：作药物，营养补充剂、增味剂、饲料等。 果糖与葡萄糖分子式完全相同，结构不同，甜度大于葡萄糖，甜味纯正 酶催化反应的介质 水是酶促反应最常用的反应介质。 但对于大多数有机化合物来说，水并不是一种适宜的溶剂。因为许多有机化合物(底物)在水介质中难溶或不溶。 由于水的存在，往往有利于如水解、消旋化、聚合和分解等副反应的发生。 是否存在非水介质能保证酶催化？？ 1984年，克利巴诺夫（Klibanov）等人在有机介质中进行了酶催化反应的研究，他们成功地在利用酶有机介质中的催化作用，获得酯类、肽类、手性醇等多种有机化合物，明确指出酶可以在水与有机溶剂的互溶体系中进行催化反应。 非水相介质中的酶促催化反应 酶能在非极性溶液中起催化作用 不溶于水或水溶液中不稳定的产品；改变酶催化功能 1、有机溶剂的选择 （1）有机溶剂对酶活的影响 对吸附在酶分子上的水分的影响； 对底物和产物的影响； 对酶的直接影响 （2）有机溶剂的选择 酶在低极性溶液中具有较高活性 logP，溶剂的疏水参数，指一种溶剂在辛醇/水两相之间的分配系数。 logP越大，溶剂疏水性越强，酶的反应活性越高 logP4，高活性和高稳定性 logP=2～4，中等活性 logP2，活性差 logP不是选择有机溶剂唯一标准 考虑因素： 与底物的相容性； 不参与主反应； 其它因素 密度、黏度、表面张力、废物处理、成本等 2、酶在有机溶剂中的催化特点 （1）酶分子在有机溶剂中的结构特点 分子内氢键主导，结构变得刚性 （2）酶的作用pH与离子强度 与水中酶的最适pH一致 （3）酶的底物专一性 酶制剂的生产成本是较高的，很多酶制剂却只能用一次，而且，如果将酶制剂直接用于催化化学反应，反应结束后酶制剂会和反应的产物混合在一起。酶制剂既不能重复使用，也影响了产物纯度。怎样才能解决这个难题呢？ 科学家是通过固定酶来解决酶不能重复使用和影响产物纯度这个难题的。即将分离纯化后的酶固定到一定的载体上，形成固定化酶。使用时，将固定的酶投放到反应溶液中，催化反应结束后又能将固定的酶回收。这样，既可反复使用又不影响反应物纯度。 三、酶的固定化 固定化酶技术 指在一定的空间范围内起催化作用，并能反复和连续使用的酶 固定化酶是通过吸附、耦联、交联和包埋等物理或化学的方法把酶连接到某种载体上，做成仍具有酶催化活性的水不溶酶。 缺点： 固定化时，酶活力有 损失 增加固定化成本 只能用于水溶性小分子底物 与完整菌株相比，不适于多酶反应，尤其是需要辅因子的反应 胞内酶需先分离 优点： 稳定性提高 反应过程更容易控制 易将底物、产物分开 产物中无酶残留 提高酶使用效率、增加产物得率 具一定机械强度 比水中的酶更适用于应用多酶体系 酶的固定化方法 1、吸附法 （1）物理吸附 （2）离子吸附 2、包埋法 将聚合物单体与酶溶液混合，再借助聚合促进剂的作用进行聚合，使酶包埋于聚合物中 （1）PAGE胶包埋 （2）辐射包埋 3、共价键结合法 将酶与聚合物载体以共价键结合 酶的功能基团与载体共价结合