免疫共沉淀技术研究进展.PDF

452 内蒙古医学杂志 Inner Mongolia Med J 2008 年第 40 卷第 4 期 免疫共沉淀技术的研究进展 李 　昊 ,李 　义 ,高建梅 ( 内蒙古医学院附属医院影像科 , 内蒙古 呼和浩特 　0 10050) [ 关键词]免疫共沉淀 ;蛋白质 ;相互作用 　　 ( ) 　　[ 中图分类号] R446 . 6 　[文献标识码] A 　[论文编号] 1004095 1 2008 　　蛋白质间的相互作用控制着大量的细胞活动事 白。用抗 P53mAb 免疫共沉淀的样品也可检测到 件 ,如细胞的增殖 、分化和死亡 。通过蛋白质间相互 HSP70 蛋白,证明人肝癌中 P53 HSP70 以复合物的 作用 ,可改变细胞内蛋白质的动力学特征 。如底物 形式而存在 ,此可为肝癌的发病机制及免疫治疗的 结合特性 、催化活性 ; 也可产生新的结合位点 ,改变 研究提供新的思路[2 ] 。肿瘤的异质性是指单克隆 蛋白质对底物的特异性 ;还可失活其它蛋白质 ,调控 起源的肿瘤细胞在生长过程中其侵袭能力 、生长速 其它基因表达 。因此 , 只有使蛋白质间相互作用顺 度 、对激素的反应 、对抗癌药物的敏感性等方面能形 利进行 ,细胞的正常生命活动过程才有保障 。另外 , 成不同表型亚克隆的特性[3 ] 。肿瘤异质性是肿瘤 还发展了可定性和定量检测蛋白质间相互作用的简 研究的一个重要方向 ,对解释肿瘤基础及临床研究 ( ) 便又快捷的方法 如表面胞质团共振等 。通过这些 中出现的诸多问题具有重要意义 。随着分子生物学 方法的联合使用 ,实验得出的蛋白质间的相互作用 技术的发展 ,对于肿瘤异质性的研究方法已从形态 的结论显得更为可靠[ 1 ] 。 学深入到细胞生物学 、分子遗传学 、分子病理学等方 面 ,但其分子水平的研究多处于基因水平 ,而对蛋白 1 　免疫共沉淀基本原理 质方面的研究甚少 。由于蛋白质是生命活动的执行 细胞裂解物中加入抗体 ,这样可与已知抗原形 者和体现者 ,细胞各种重要的生理过程都是以蛋白 成特异的免疫复合物 ,若存在与已知抗原相互作用 质间相互作用来实现的 , 因此通过研究蛋白质的相 的蛋白质 ,则免疫复合物中还应包含这种蛋白质 ;经 互作用来探讨肿瘤异质性 ,将更直接 、全面揭示异质 过洗脱 ,收集免疫复合物 ,然后分离该蛋白质 ,对该 性的发生机理及调控过程 。借助于免疫共沉淀法来 蛋白质进行 N 端氨基酸序列分析 ,推断出相应的核 研究肿瘤异质性的分子机制无疑是一条很好的途 苷酸序列 。将包含活性物质的组织或细胞构建成 径 ,随着这一研究方法的完善 ,它将在细胞异质性的 cDNA 文库 , 以上述核苷酸序列为探针从 cDNA 文 研究中发挥重要作用[4 ] 。 库中分离出cDNA 克隆。 2 . 2 　酶与病毒 ( ) 端粒酶 或端粒体酶 是一种能延长端粒末端的 2 　免疫共沉淀技术的应用