植物生物技术重点.docVIP

生物技术的定义 生物技术(biotechnology)，也称生物工程 (bioengineering), 是指以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理, 按照预先的设计改造生物体或加工生物原料, 为人类生产出所需要的产品或达到某种目的的一系列技术。 现代植物生物技术包括：植物组织培养技术，人工种子技术，细胞工程技术，基因工程技术 植物组织培养定义 在人工操作下把离体植物器官（根、茎、叶、花、果）、植物组织（表皮、胚、胚乳、形成层、愈伤组织）、植物的细胞（游离的体细胞、大小孢子）和植物的原生质体在无菌的条件下培养，使它们继续生长、发育成完整植株的所有培养技术的总称，也称之为离体培养（In vitro culture）或试管培养 植物组织培养在农业生产中的应用 育种上的应用： 单倍体育种：快速纯化个体，缩短育种年限， 提高育种效率等作用。 远缘杂交：克服杂交不亲和性，用于植物的远缘杂交；体细胞杂交；胚珠培养。 体细胞变异的应用：果树苗木等。 单细胞突变体的筛选：抗性育种 种子繁育与生产： 快速繁育：兰花、香蕉、甘蔗、咖啡等。 获得脱毒植株，提高种性：病毒可通过维管束传递，茎尖细胞分裂很旺，几乎没有病毒， 如土豆。 人工种子：不受气候影响，苜蓿、芹菜、胡萝卜等。 植物产品的工厂化生产： 喜树的喜树碱（抗癌），人参皂苷，香料植物的香油精。 种质资源的保存 对于难于产生种子，种子不易保存，或珍稀的植物。番薯的块根保存很难，可以取其茎尖进行组织培养，进行保存 培养基种类 据其营养水平分：基本培养基、完全培养基 据其态相分： 固体培养基、液体培养基 据其作用分：诱导培养基、增殖培养基、生根培养基 据培养物的培养过程分：初代培养基、继代培养基 组织培养中常用的培养基主要有： MS、White、N6、B5、Heller、Nitsch、Miller、KM-8P MS培养基--大量元素。 特点：无机盐的浓度高，具有高含量的氮、钾，尤其硝酸盐的用量很大，同时还含有一定数量的铵盐，这使得它营养丰富，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，有加速愈伤组织和培养物生长的作用，当培养物久不转移时仍可维持其生存 N6 培养基 特点： KNO3和(NH4)2SO4含量高，不含钼。目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花粉和花药培养和组织培养 B5 培养基 特点：含有较低的铵盐，较高的硝酸盐和盐酸硫胺素。铵盐可能对不少培养物的生长有抑制作用，但它适合于有些植物如双子叶植物特别是木本植物的生长。 灭菌：用物理或化学方法，杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体，即所有生命的物质全部杀死。 物理灭菌：高温高压灭菌、干热灭菌(烘烧和灼烧)、湿热灭菌、辐射(紫外线、超声波、微波)灭菌、过滤灭菌。 化学灭菌：酒精、升汞、过氧化氢、高锰酸钾、次氯酸钠、抗生素等化学药品处理，根据工作中的不同材料不同目的适当选用。包括：熏蒸灭菌、喷雾灭菌、消毒液灭菌。 培养基一般采用湿热灭菌法，压力108kPa、温度为121℃时，维持20min，即可达到灭菌的目的。某些激素（如GA3、ZT、IAA）、抗生素以及某些维生素等，遇热时容易分解，不能进行高压灭菌 ，用过滤灭菌。 外植体消毒 外植体的成苗途径：1愈伤组织2胚状体3器官发生4原球茎 途径 培养基的成分 水，无机盐 有机成分，植物生长调节剂，碳源 ，凝固剂 其它附加物 无机营养：无机物中有16种是植物必须的，即C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl 当某些营养元素的供应不足时，愈伤组织生长和发育会出现一些特殊的症状，如：缺氮：表现出一种很注目的花色素苷的颜色，愈伤组织不能形成导管；缺钾或磷：细胞过度生长，形成层组织减退；缺硫：愈伤组织褪绿；缺铁：细胞分裂停止；缺硼：细胞分裂停滞，细胞伸长；而缺锰铜则会影响细胞伸长。 2、有机成分--氨基酸：氨基酸是蛋白质的组成成分，也是一种有机氮化合物。 有机氮作为培养基中的惟一氮源时，离体组织生长不良，只有在含有无机氮的情况下，氨基酸类物质才有较好的效果。 维生素：能明显地促进离体组织的生长。培养基中的维生素主要是B族维生素 天然有机物：有机附加物包括有些成分尚不清楚的天然提取物，如椰乳(CM)、香蕉泥、番茄汁(TJ)、马铃薯泥、苹果汁、生梨汁、西瓜汁、酵母提取液（YE）、麦芽浸出物（ME）等。 有机成分 -- 肌醇 肌醇：环己六醇，帮助活性物质作用其他：单核苷酸等。 碳源：糖在植物组织培养中是不可缺少的。它不但作为离体组织赖以生长的碳源，且还能使培养基维持一定的渗透压（一般培养基渗透压维持在1.5～4.1MPa）。 激素：激