持续低温对玉米幼苗生理指标的影响.doc

持续低温对玉米幼苗生理指标的影响 陈宇杰 东北农业大学 生命科学学院 生科0801 【摘要】 本次实验通过对植物进行低温胁迫的处理，进行正常植株与低温植株的叶绿素含量、电导的测定、根系活力、过氧化氢酶活力、以及植物叶子水势五个指标的测定，对植物在持续低温的情况下的生理状况进行研究，结果表明植物的代谢能力加强，但是储存机制变弱，植物细胞的活力也受到了很大的影响，根的吸收及活力都会收到影响。实验的主要是利用分光光度计与科学的数学方法对实验数据的处理使得实验数据更加的可信，更加有说服力。 【关键词】 玉米 低温 叶绿素 根活力 酶活力 水势 电导率 不利于植物生存和生长的环境条件统称为逆境或环境胁迫,包括冷、热、旱、涝、盐碱、缺素、大气土壤污染等各种物理化学胁迫以及来源于病虫、杂草的生存竞争胁迫。在逆境条件下,植物体会受到伤害,发生一系列生理变化:吸水能力降低,体内水分亏缺；原生质膜结构遭到破坏,主动运输能力下降；透性增大,胞内物质外渗；气孔关闭，叶绿素含量降低，酶活性降低,光合作用下降；呼吸作用增强,消耗大量营养物质；糖类和蛋白质大量水解；各细胞器也遭受可逆或不可逆的损伤。玉米的低温冷害在世界上许多国家均有发生, 其中尤以日本、朝鲜和中国的东北地区为甚。所以，在低温胁迫下，植物的表征就是一个很重要的指标，对植物的生理以及产量的研究是一个非常重要的研究项目，是很有意义的。 1材料与方法： 1.1材料：玉米幼苗 精选种子400粒左右,用蒸馏水将玉米种子洗净，放入大烧杯。先用75%酒精浸泡10s后用蒸馏水洗净残余酒精，再用5%次氯酸钙浸泡10min后用蒸馏水洗净，加蒸馏水没过种子，37℃恒温暗培养进行催芽。16h后，用蒸馏水洗三次，洗去种子表面抑制生长的物质。将大烧杯中水倒净，用干净的湿布塞住烧杯口,目的是保湿，加盖培养皿保持水分，37℃恒温暗培养，每隔4小时左右用蒸馏水洗三次。然后进行沙培，将沙子平铺在培养盘上，用喷壶浇适当的完全营养液。将种子放在沙子上，种脐向上，种子间距离适当。种子上覆盖适当的沙子，约1cm厚，保证沙子湿度适当，为保湿，将培养盘上面盖上一层塑料膜。当种子有三分之二发芽的时候，接下塑料布，进行缺素培养，配方如表1所示。培养大约15d后， 进行实验研究。 表1 缺素培养储备液配方 储备液 每100mL培养液储备液用量(mL) 全素 缺磷 缺铁 缺镁 Ca(NO3)2 0.5 0.5 0.5 0.5 KNO3 0.5 0.5 0.5 0.5 MgSO4 0.5 0.5 0.5 - KH2SO4 0.5 - 0.5 0.5 K2SO4 - 0.5 - - Na2SO4 - - - 0.5 EDTA-Fe 0.5 0.5 - 0.5 微量元素 0.1 0.1 0.1 0.1 1.2方法 挑选生长状况一样的植株，一个在正常下培养一个在5度下进行培养，培养七个小时，然后将苗取出，进行实验，分别对正常组与实验组进行实验，最后将实验进行对比，具体实验步骤如下。 1.2.1叶绿素含量的测定 取常温叶片0.5g放入研钵中，加入少量石英砂和碳酸钙粉及95%乙醇10mL，充分研磨成匀浆。过滤。用95%乙醇将滤液定容至25mL，摇匀，得到叶绿素提取液。把叶绿素提取液倒入光径1cm的比色杯内，以95%乙醇为空白，分别在波长665nm,649nm下测定吸光度。记录数据。 取处理后叶片按照上述方法再做一次。 1.2.2电导法测定植物组织抗逆性 取常温叶片0.5g，用蒸馏水洗净后切成小片，放入注射器内，吸取10mL蒸馏水，堵住注射器口进行抽气，直至叶片沉入蒸馏水中为止。将叶片及溶液倒入小烧杯中，测定其电导值。然后用微波炉将其煮沸，冷却至室温后，测定其终电导值。测定水的电导值。 取处理后叶片按照上述方法再做一次。 1.2.3根系活力的测定 1.2.3.1 标准曲线的制作： 2.2.2.1.1 取2.50mL 1% 的TTC，用乙酸乙酯定容至100mL 容量瓶加足量Na2S2O4反应，分别取 0 2.50 5.00 7.50 10.00 12.50 15.00 17.50 20.00 mL 用乙酸乙酯定容至50mL容量瓶，以0为对照，在485nm波长下测其余吸光度值。 1.2.3.2实验的测定 称取常温根系样品0.5g，放入烧杯中，加入0.4%TTC溶液和磷酸缓冲液各5mL。把根充分浸染在溶液中，在37℃下暗保温1h。此后加入2mL H2SO4（1mol/L）终止反应。做一对照组，先加2mL H2SO4（1mol/L），再加根系样品0.5g，加入0.4%TTC溶液和磷酸缓冲液各5mL，在37℃下暗保温1h。 将根取出，吸干后与3.5mL乙酸乙酯一起在研钵中研磨，以提出甲腙。将红