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⑵ 决定蛋白质空间构象的因素 ① 蛋白质的氨基酸序列 ②肽键的刚性平面性质 由于C=O双键中的π电子云与N原子上的未共用电子对发生“电子共振”,使肽键具有部分双键的性质,不能自由旋转。 与肽键相连的六个原子构成刚性平面结构,称为肽单元或肽键平面。 但由于α-碳原子与其他原子之间均形成单键,因此两相邻的肽键平面可以α-碳原子作相对旋转,旋转的相对角度称Cα原子的两面角?和? ,可描述多肽的所有可能构象。 天然状态,有催化活性 尿素、 β-巯基乙醇 去除尿素、 β-巯基乙醇 非折叠状态,无活性 蛋白质的颜色反应 ⒈ 茚三酮反应(ninhydrin reaction) 蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。 ⒉ 双缩脲反应(biuret reaction) 蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热,呈现紫色或红色,此反应称为双缩脲反应,双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。 双缩脲反应 蛋白质在碱性溶液中也能与硫酸铜发生相同反应,产生红紫色络合物 红紫色络合物 (碱性溶液) Cu2+ 3、米伦氏反应 试剂:硝酸汞、亚硝酸汞、硝酸和亚硝酸的混合液 现象:产生白色沉淀,加热后沉淀变成红色 检测基团:酪氨酸及含有酪氨酸的蛋白质 4、乙醛酸反应 试剂:乙醛酸和浓硫酸 现象:出现紫色环 检测基团:吲哚基化合物。 色氨酸及含有色氨酸的蛋白质 5、坂口反应 试剂:次氯酸钠及?-萘酚的氢氧化钠溶液 现象:红色产物 检测基团:精氨酸及含精氨酸的蛋白质 6、福林试剂 试剂:碱性硫酸铜及磷钨酸-磷钼酸 现象:蓝色化合物 检测基团:酪氨酸及含有酪氨酸的蛋白质 本章小结 1、20种基本氨基酸以及性质 2、蛋白质的一级、高级结构 3、蛋白质结构与功能的关系中涉及到的几种生理现象 4、蛋白质的物理化学性质 5、蛋白质一级结构测定 《蛋白质》课上习题 1、维持蛋白质二级结构稳定的主要因素是:( )A、静电作用力???? B、氢键???? C、疏水键???? D、范德华作用力 2、在下列所有氨基酸溶液中,不引起偏振光旋转的氨基酸是( )A、丙氨酸???? B、亮氨酸???? C、甘氨酸???? D、丝氨酸 3、在生理pH情况下,下列氨基酸中哪个带净负电荷?( )A、Pro???? B、Lys???? C、His???? D、Glu 4、测定某一生物样品含氮量为4g,则该样品中所含蛋白质为( ) A、 24g;B、64g;C、 25g;D、 18g 5、有关血红蛋白(Hb)和肌红蛋白(Mb)的叙述不正确的是( ) A、都可以和氧结合,但结合曲线不同 B、 Hb和Mb都含铁 C、都是含辅基的结合蛋白 D、都具有四级结构形式 E、都属于色蛋白类 B C D C E 3.α-螺旋( ) A.为右手螺旋 B.绕中心轴盘旋上升 C.螺距为0.54nm D.靠肽键维持稳定 E.为二级结构 7.谷胱甘肽的功能包括 ( ) A.解毒 B.是细胞内的重要还原剂 C.参与细胞间的信息传递 D.参与氨基酸的吸收及向细胞内的转运 E.是细胞的重要供氢体 4.空间构象包括 ( ) A.β-折叠 B.结构域 C.亚基 D.α-螺旋 多项选择 ABCE ABD ABCD 课后习题 名词解释: 等电点、结构域、超二级结构 简答题: 某氨基酸溶于pH7的水中,所得氨基酸溶液的pH为6, 问此氨基酸的pI是大于6、等于6还是小于6? 推断题: 书中第113页第8题 (2)一级结构与生物进化 同源蛋白质的研究:也叫同功能蛋白质,有助于研究生物进化。 A、同源蛋白质的概念: 是指在不同生物体中实现同一功能的蛋白质。它的一级结构中有许多位置的aa对所有种属来说都是相同的,称为不变残基。其他位置的aa差异较大,称为可变残基。这种aa顺序中的相似性称为顺序同源现象。 例如: 牛、猪、羊、人等在中属上差异很大,但它们的胰岛素 在一级结构上几乎一致,仅在A链的第8,9,10位上的 3个氨基酸有差异。 细胞色素c是一种广泛存在于生物体内,具有铁卟啉的色蛋白(含有104个氨基酸残基),在生物氧化中起传递电子的作用。120个物种,28个aa位置不变,是维持构象上发挥功能的必要部位。可变残基随进化而变异,亲缘关系越近,aa差异越小。 B、分子进化: 分子进化树 (2)一级结构与
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