基因工程（研究生）.pptVIP

基因克隆技术概论 clone技术有三个层次 整体水平：克隆羊多莉的出现 细胞水平：制备单克隆抗体时 分子水平（即分子克隆）：即制备 DNA片段，通过载体导入受体细 胞，在受体细胞中复制、扩增，以 获得单一DNA分子的大量copy. M13噬菌体的最大优点是噬菌体颗粒中所含的是 单链DNA，该单链DNA可作为模板用于DNA序列 分析，利用单链M13克隆可制备成单链DNA探针 用于杂交分析，检测DNA或RNA，或者作为基因 定点诱变的载体。噬菌体成熟后钻出宿主细胞而 不破碎细胞，可以从细菌培养液的上清液中获得 噬菌体，制备单链DNA，而双链噬菌体DNA可通 过裂解细菌进行制备。 转录终止和加poly(A)：真核基因表达的过程中，RNA 聚合酶Ⅱ通常跨过poly(A)位点继续进行转录，因此，成 熟的mRNA3? 端是经过位点特异性的转录后切割并加上 poly(A)而形成的