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反式作用因子的激活方式如下: (1)翻译起始因子的功能调控 eIF-2是蛋白质合成过程中重要的起始因子。有些物质可以影响eIF-2的活性,调节蛋白质合成的速度。培养的真核细胞处于营养不足时,eIF-2失活,最终导致肽链起始效率降低。 (2)阻遏蛋白的调节作用 所有进入胞浆的mRNA分子并不是都可以立即与核糖体结合,翻译成蛋白质。由于存在一些特定的翻译抑制蛋白可以与一些mRNA的5ˊ端结合,从而抑制了蛋白质翻译。如铁蛋白。 1.翻译起始的调控 (四)翻译水平的调控 (3) 5’AUG对翻译的调节作用 真核mRNA为模板的翻译开始于最靠近其5ˊ端的第一个AUG。90%以上的真核mRNA符合第一AUG规律。但在有些mRNA中,在起始密码子AUG的上游非编码区有一个或数个AUG,称为5ˊAUG。5ˊAUG的阅读框通常与正常编码区的阅读框不一致,不是正常的开放阅读框。如果从5ˊAUG开始翻译,很快就会遇到终止密码子。因此,若从5ˊAUG开始翻译,就会翻译出无活性的短肽。 意义:5ˊAUG可以降低正常AUG启动翻译的作用,使翻译维持在较低水平。5ˊAUG多存在于原癌基因中,是控制原癌基因表达重要调控因素。5ˊAUG缺失是某些原癌基因翻译激活的原因. (4) mRNA 5ˊ端非编码区长度对翻译的影响 起始密码AUG上游非编码区的长度可以影响翻译水平。当第一个AUG密码子离5ˊ端帽子的位置太近时,不容易被40S亚基识别。 当第一个AUG密码子距5ˊ端帽子结构的距离在12个核苷酸以内时,有一半以上的核糖体40S亚基会滑过第一个AUG。 当5ˊ端非编码区的长度在17至80核苷酸之间时,体外翻译效率与其长度成正比。 所以第一个AUG至5ˊ端之间的长度同样影响翻译起始效率和翻译起始的准确性。 意义:降解途径保证mRNA不在细胞中积累并避免合成过多的蛋白质。 由于mRNA是翻译蛋白质的模板,其量的多少直接影响蛋白质合成的量。mRNA的稳定性是翻译水平调控的一个重要因素。mRNA半衰期越长,翻译效率越高,因而在细胞内合成蛋白质的量亦愈多。 在真核细胞中,mRNA的稳定性差别很大。 暂时需要的基因产物:半衰期只有几分钟甚至几秒种。 经常需要的基因产物:其mRNA可在多代细胞中稳定。 2. mRNA稳定性的改变也可调节基因的表达 一种途径为poly(A)尾的逐渐缩短。 为最常见的途径。mRNA一旦进入胞浆,核酸外切酶即开始对poly(A)尾末端逐渐缩短。当剩下30个左右A时,5’端发生脱帽, mRNA分子被迅速降解。 一些mRNA分子的3’UTR的特殊序列信号有助于特殊蛋白质的结合,增加或降低poly(A)尾的降解速度。 另一种途径始为特殊的内切酶的作用。 可将poly(A)尾从mRNA分子上直接切除,这种切除也有赖于mRNA分子上3’UTR的特殊序列信号可以被被内切酶识别。 真核mRNA的降解有两种途径: 翻译后调控指蛋白质生物合成之后对其表现生物活性和特定功能的时空控制过程。主要包括以下过程:蛋白质分子的折叠(folding)、修饰加工(modification processing)、分选(sorting)和传送(transporting)。相当多的蛋白质在翻译的同时进行折叠。折叠过程需要分子伴侣及其一些因子参与。 (五)翻译后水平的调控 分子伴侣(molecular chaperone)系一类对于其他蛋白质的装配和折叠所需要的蛋白质,他本身并不是被装配和折叠的蛋白质的组成成分。 分子伴侣在蛋白质生物合成、蛋白质膜转位和折叠中起重要作用。他们阻止新合成的多肽链发生聚集,然后介导其折叠和组装,使其由非天然构象(无活性)变为天然构象(有活性)。 蛋白质前体的剪辑; 限制性蛋白酶水解作用; 辅基的连接和交联作用; 蛋白质侧链的化学修饰. 蛋白质翻译后的修饰加工: 是指将具有正确折叠和正确装配具有四级结构和生物活性的蛋白质分选出来,并传送至细胞特定的部位,以便达到蛋白质功能的时空表面。负责蛋白质分选和传送的主要细胞器是高尔基体。 蛋白质的分选和传送: 谢 谢! DNA结合域的结构类型有: 锌指结构(zinc finger) 螺旋-转折-螺旋(Helix-turn-helix,H-T-H) 碱性-亮氨酸拉链(basic-leucine zipper) 螺旋-环-螺旋(basic–helix /loop /helix,bHLH) ①锌指结构 定义:是一种常出现在DNA结合蛋白中的结构基元。是由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn构成,形成像手指状的结构。 (A)Cys
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