南开大学化学学院1[第一章 绪论]色谱技术.pptVIP

现代分离分析方法 张智超 教授 南开大学元素有机化学研究所 实验室：中心实验室B313 电话： Email: zczhang@nankai.edu.cn 凯氏定氮法（丹麦化学家J. Kjeldahl于1883年提出） 1) 消化： 第一章 绪论 1 色谱法的历史、现状和未来 2 色谱法和其它方法的比较和配合 2.1 色谱法的特点和优点 2.2 与其它方法的比较和配合 3 色谱法的分类 3.1 按流动相和固定相聚集态分类 3.2 按固定相的使用形式分类 3.3 按所用的物理化学原理分类 3.4 按色谱的动力学过程分类 4 有关分离分析的国内外主要期刊 5 本课程主要内容 6 本课程的主要参考书 Tswett1903年3月21日华沙自然科学学会生物学会会议 德国化学家 Kuhn 和 Lederer 1941年 A.J.P. Martin 和 R.L.M. Synge 发表论文 1956年 Van Deemter 等在前人研究的基础上提出了“速率理论”，为色谱的发展奠定了理论基础。 平面色谱的发展超临界流体色谱的发展毛细管电泳的发展微全分析系统（芯片实验室） 不同年代各种分析方法所占的比例 3.3 按所用的物理化学原理分类 (分离过程的机理) 吸附色谱 分配色谱 按其它作用原理 体积排阻色谱法 多种称呼： 体积（空间、分子、液体）排阻法 分子筛色谱法 SEC, Size-Exclusion Chromatography 用于大分子的分离 生化领域中，用水作流动相，称为凝胶过滤色谱法 （ Gel Filtration Chromatography） 合成高聚物领域中，用有机溶剂作流动相，称为凝胶渗透色谱法 （Gel Permeation Chromatography, GPC） 亲合色谱法 (Affinity Chromatography, AC) 生物体内生物分子之间相互具有亲合力，能形成可逆的络合物。把配基键合到不溶于水的惰性载体上成为亲合物，从而进行色谱分离。 3.4 按色谱的动力学过程分类 洗脱法 (冲洗法) 前沿法 (迎头法) 顶替法 (置换法) 洗脱法 (冲洗法) 将试样加入色谱柱入口端，然后用流动相冲洗，各组分随着流动相的流动，在两相间反复的分配和再分配，由于各组分的平衡常数不同，于是被流动相带出色谱柱的时间也就不同。 前沿法 (迎头法) 用试样本身或将试样溶解在溶剂中做流动相，在柱后得到台阶形的浓度变化曲线。 利用HPFA方法研究药物－血浆蛋白结合时，进样量足够大，样品在柱内形成一段区带,在区带内游离药物浓度和蛋白结合浓度一直保持平衡状态，游离药物浓度保持相对恒定,经过检测器得到平台峰。平台峰高度和峰面积分别与游离型药物和总药物浓度呈线性关系，这是该技术定量分析的基础。 1、“高效前沿分析的发展及在药物-蛋白结合 研究中的应用” 杨更亮等. 化学通报, 2003, (5): 327-332 2、“高效前沿分析法应用于药物与蛋白结合研究” 暴领群. 药学研究, 2001, 25(2): 84-87 顶替法 (置换法) 当试样加入色谱柱后，再把固定相对之吸附力或溶解力比对所有组分都强的物质加入柱中，即直接用流动相作为“顶替剂”。此后，各组分按吸附力或溶解能力由小到大的顺序依次被顶替流出。 4 有关分离分析的国内外主要期刊 1、Journal of Chromatography A 简写：J. Chromatogr. A 荷兰 Elsvier 出版 IF=3.0 1958年创刊 J. Chromatogr. 1994年起 J. Chromatogr. A 起初为月刊，1968年（32卷）改为双周刊， 后来改为周刊 《色谱分析概论》 《气相色谱方法及应用》 《高效液相色谱方法及应用》 《平面色谱方法及应用》 《离子色谱方法及应用》 《毛细管电泳技术及应用》 《亲和色谱方法及应用》 《裂解气相色谱方法及应用》 《色谱联用技术》 《色谱柱技术》 《气相色谱检测方法》 《液相色谱检测方法》 3、Journal of Separation Science 简写: J. Sep. Sci