8 病毒的遗传分析课件.pptVIP

* 8 病毒的遗传分析 主要内容: 1??噬菌体的突变型及基因重组的特点； 2 噬菌体的互补测验与顺反子测定； 3 用两点测交与三点测交测定噬菌体交换值; 4 ?噬菌体基因组结构特点； 5 原噬菌体对细菌基因重组的影响(合子诱导）; 6 噬菌体的线状染色体与环状连锁图。 8.1 病毒的形态结构与基因组 8.1.1 病毒的形态结构 病毒:一种不具备细胞结构的生物体，只有寄生在宿主细胞中才能生存。其基本结构包含核酸外壳蛋白。有些病毒的外壳外还有一层脂质或脂蛋白组成的包膜，有的包膜表面还有蛋白质或糖蛋白突出的结构刺突。 8.1.2 病毒的基因组 DNA病毒和RNA病毒； 噬菌体的核酸大多为DNA；植物病毒的核酸大多为RNA，少数为DNA；动物病毒部分是RNA ，部分是RNA；真菌病毒的核酸大多是RNA。 RNA病毒多为单链，线状，有正、负链之分；DNA病毒多为双链，少数为单链正DNA，腺病毒为-DNA；噬菌体多为线状双链DNA。真菌病毒都是双链RNA，藻类病毒都是双链DNA。 8.2 噬菌体的增殖与突变型 8.2.1 噬菌体的繁殖 （1）烈性噬菌体的增殖 如：E.coli的T噬菌体系列（T1-T7）。 T偶列 噬菌体 头部：双链DNA分子 颈部：中空的针状结构及外鞘 尾部：由基板、尾针和尾丝组成 T偶列噬菌体的侵染过程（如T4噬菌体）： 尾丝固定于大肠杆菌，注入遗传物质→破坏寄主细胞遗传物质→合成噬菌体遗传物质和蛋白质→组装子代噬菌体→裂解细菌→释放出子代噬菌体。 （2）温和噬菌体的增殖 λ噬菌体的宿主是大肠杆菌K12。噬菌体侵入后，细菌不裂解→附着在E.coli染色体的gal和bio位点间的attλ座位上→整合到细菌染色体上，并能阻止其它λ噬菌体的超数感染。 超数感染：一个细菌受一个以上同种噬菌体感染的现象。 ①λ噬菌体 P1噬菌体并不整合到细菌的染色体上，而是独立地存在与细菌细胞质内。 ② P1噬菌体 ③ 原噬菌体 整合到宿主基因组中的噬菌体。只有少数基因活动，表达出阻遏物，关闭其他基因。原噬菌体经诱导可转变为烈性噬菌体。 8.2.2 噬菌体的突变型 （1）条件致死突变型 SUS噬菌体 ② 抑制因子敏感突变（sus）：实质是原来正常 的密码子变成了终止密码子，因而翻译提前终止， 不能形成完整肽链而产生有活性的蛋白质。 ① 温度敏感突变型 细菌 su-：不产生子代 su+：产生子代 宿主菌基因型 su- su+amb su+och su+op + + + + - + + - - - + - - - - + 野生型 sus amber sus ochre sus opal 噬菌体基因型 表8-2 不同宿主菌中sus突变噬菌体的表型 根据在带有转一性抑制基因的宿主中的非致死性： Ⅰ 琥珀突变（amb): UAG；Ⅱ 赭石突变(och):UAA Ⅲ 乳白突变(op): UGA su1+ 丝氨酸 28 - su2+ 谷氨酰胺 14 - su3+ 酪氨酸 55 - su4+ 酪氨酸 16 + su5+ 赖氨酸 5 + 琥珀型抑 插入的 合成的蛋白质 赭石型抑 制基因 氨基酸 占野生型% 制基因 5种琥珀抑制基因的性质 （2）噬菌体形态和宿主范围的突变型 ① 噬菌斑形态突变型 野生型r+：小而边缘模糊的噬菌斑。 原因：有两个以上的噬菌体侵染一个细菌时，出现溶菌阻碍现象，混有裂解和未裂解的细胞。 突变型r：大而边缘清晰的噬菌斑。 原因：无溶菌阻碍现象。 鉴别：噬菌斑大小。 ② 寄主范围突变型 大噬菌斑 大噬菌斑 小噬菌斑 rⅢ S E.coli K(?) E.coli B 小噬菌斑 无噬菌斑（致死） 大噬菌斑 rⅡ 大噬菌斑 大噬菌斑 大噬菌斑 rI 小噬菌斑 小噬菌斑 小噬菌斑 野生型 不同大肠杆菌菌斑平板上表型 类 型 表8-4 T4野生型和突变型的区别 8.3 噬菌体突变型的重组测验 8.3.1 Benzer的重组测验与基因的精细结构分析 1） 噬菌体杂交实验