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3.3 糖化剂的制备 我国使用糖化剂的种类及其生产过程的演变: 3.3.2 常用的糖化剂生产菌及其酶系特性 1.α-淀粉酶 2.β-淀粉酶 3.淀粉-l,4-葡萄糖苷酶(简称糖化酶) 4.纤维素酶 5. 多聚半乳糖醛酸酶(果胶酶) 6. β-半乳糖苷酶 7. 蛋白酶 1.淀粉-1,4糊精酶 淀粉受到α-淀粉酶的作用后,遇碘呈色很快反应,如下表现: 蓝→紫→红→浅红→不显色(即碘原色) 最适pH范围为5.5~7.0,稳定pH范围为5.0~10.0,有效pH范围为5.0~8.0。 最适作用温度在90℃以上。 2. β-淀粉酶 反应:从多糖分子的非还原性末端,每隔2个葡萄糖苷切割α-1,4葡萄糖苷键,生成麦芽糖。 应用:与α-淀粉酶一起用于淀粉水解,常用于面包和酒精生产。也可用于高麦芽糖浆生产。 最适pH为5, pH4~6.5可保持90%活性。 温度为55~57℃时活性最高,60 ℃以上活性急剧下降。 作用于淀粉的α- l,4葡萄糖苷键,能从葡萄糖键的非还原性末端起将葡萄糖单位一个一个的切断,又称为外切淀粉酶。 糖化酶作用淀粉时,还原糖的增加比α-淀粉酶快,但是碘色消失得慢,淀粉的粘度也不象α-淀粉酶那样迅速下降。 最适pH范围为4.0~4.5,最适温度范围为58~60℃。 主要产生菌:霉菌,特别是黑曲霉。 最适pH是4.0±0.5,而在pH3.0~5.5之间,能保持80%的活性。 60~65℃时活性最高。 反应:水解纤维素,切割β-1,4葡萄糖苷键,生成葡萄糖。 正常作用温度为40~50℃,最适宜的pH值为4~5。 5、多聚半乳糖醛酸酶(果胶酶) 反应:随机分解果胶或其他聚半乳糖醛酸中的1,4-α-D半乳糖醛酸键。 应用:在生粉酒精发酵中添加,可降低醪液粘度,加快发酵进程,提高出酒率。 主要产生菌:曲霉菌属。 最适pH4.0~4.8。 40℃下该酶稳定 6. β-半乳糖苷酶 反应:分解β-半乳糖苷键,从乳糖的非还原性末端将D-半乳糖基团切割下来。 应用:分解乳糖为葡萄糖和半乳糖,可用于乳清酒精发酵。 最适pH7.0,最适温度35℃。 7.转移葡萄糖苷酶 作用是由麦芽糖上水解下来一分子的葡萄糖,又转移给另一分子的葡萄糖或麦芽糖或潘糖。 由于有转移葡萄糖苷酶的存在,倘若增加了 α-淀粉酶,就容易积累非发酵性糖,会影响淀粉的出酒率。 8. 其他 蛋白酶 单宁酶 1、酒精生产对糖化菌的要求 丰富的糖化酶; 含有一定量的液化酶; 蛋白酶含量适量; 不含或少含转移葡萄糖苷酶; 耐酸; 抗杂菌; 易培养; 易保藏,不易退化,生产性能稳定。 在酒精与白酒生产中曾使用过的糖化菌主要有曲霉属的米曲霉(ASP.oeryze),黄曲霉(ASP.fLavus),乌沙米曲霉(ASP.usamii),甘薯曲霉 (ASP.batatae),黑曲霉(ASP.niger)等。其中黑曲霉及乌沙米曲霉用得最广。 2、酒精生产常用的糖化剂菌及其酶系特性 1)常用的糖化剂生产菌 ①α-淀粉酶生产菌株 早期:黄曲霉 ——枯草杆菌(Bac.subtilis) ② 糖化剂生产菌株 黑曲霉 泡盛曲霉 毛霉或根霉菌(阿米诺法) 以根霉作为糖化剂,加酵母作为发酵剂,称为阿米诺根霉酒母法。 黑曲霉As3·4309菌株 中国科学院微生物研究所诱变育种的糖化酶菌种。 特点:用它生产的糖化剂有较高的糖化力,酶系较纯,酶活性强,在一定的酸度范围内酶活力损失较小,即具有较强的耐酸能力,但液化力较弱。此菌体孢子萌发迟缓,培养时间长,营养要求高,易发生糖化力下降快等现象。 2)霉菌淀粉酶的体系与性质 霉菌所含的淀粉酶体系与谷芽不同,大麦芽含α-淀粉酶与β-淀粉酶。而曲霉不含β-淀粉酶,主要含糖化酶(淀粉1,4;1,6葡萄糖苷酶)、α-淀粉酶,及少量的转苷酶。根霉几乎不含α-淀粉酶,糖化酶含量丰富。 许多研究结果表明,不同菌种产生的淀粉酶系统具有不同的组成。同一种酶也由于来源不同而在性质上有明显的差异。 米曲霉含有活性较强的α-淀粉酶,而糖化酶含量较少,但菌株不同含量也有不同。其淀粉酶作用最适pH为5.0—5.5,最适温度为50—55℃。在pH2.0,0℃处理15min,可将α-淀粉酶消除,而只保留糖化酶。在pH7时,60℃处理15min可将糖化酶作用消除,而保留α-淀粉酶。其淀粉水解产物葡萄糖与麦芽糖分子之比,因菌株不同而稍有出入。一般为1∶1。米曲霉制成的曲对淀粉作用4h,淀粉糖化率达75—80%。 黑曲霉的糖化酶活性高,而α-淀粉酶的活性较低,但亦随菌种而异,如泡盛曲霉其α-淀粉酶的活性就较高。黑曲霉中的糖化酶活性比米曲霉高几倍。黑曲霉糖化最适pH为4.0~4.6,最适温度为60~65℃。有人指出,它的α-淀粉酶较耐酸,糖化酶较耐热。在酒精发酵中黑曲能将淀粉几乎全部转变为葡萄糖
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