第四章 生物信息(mRNA - Protein).ppt

page 第四章 生物信息传递from mRNA to Protein 讲授内容： 4.1 遗传密码三联子 4.2 tRNA的结构、种类与功能 4.3 核糖体的结构与功能 4.4 蛋白质合成的生物学机制 4.5 蛋白质的运转机制 1、蛋白质生物合成的大致框架； 2、遗传密码三联子。 translation: 翻译是指将mRNA链上的核苷酸从一个特定的起始位点开始，按每3个核苷酸代表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。 参与合成蛋白质的主要元件 核糖体是蛋白质合成的场所，mRNA是蛋白质合成的模板，转移RNA（transfer RNA，tRNA）是模板与氨基酸之间的接合体。 此外，在合成的各个阶段还有许多蛋白质、酶和其他生物大分子参与。 4.1 遗传密码(genetic codon)——三联子 　 mRNA上每3个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这3个核苷酸就称为密码，也叫三联子密码。 翻译时从起始密码子AUG开始，沿着mRNA 5’→3’ 的方向连续阅读密码子，直至终止密码子为止，生成一条具有特定序列的多肽链——蛋白质。新生的多肽链中氨基酸的组成和排列顺序决定于其DNA（基因）的碱基组成及其顺序。 因此，作为基因产物的蛋白质最终是受基因控制的。 4.1.1? 三联子密码及其破译 遗传密码的破译，即确定代表每种氨基酸的具体密码。 蛋白质中的氨基酸序列是由mRNA中的核苷酸序列决定的，所以，要知道它们之间的关系就要弄清核苷酸和氨基酸数目的对应关系。mRNA中只有4种核苷酸，而蛋白质中有20种氨基酸。 遗传密码的试拼 1954年G.Gamov 《Nature》杂志对破译密码首先提出了设想 若一种碱基对应与一种氨基酸，那么只可能产生4种氨基酸; 若2 个碱基编码一种氨基酸的话，4种碱基共有42=16种不同的排列组合; 3个碱基编码一种氨基酸，经排列组合可产生43=64种不同形式 若是四联密码，就会产生44=256种排列组合。 遗传密码的阅读是完全重叠的 1957年Brenner,S.否定了遗传密码重迭阅读的可能性 遗传学证明： (1) T4噬菌体 吖啶类试剂 移码突变 (2)烟草坏死卫星病毒，400氨基酸=1200核苷酸 生化技术证明： 体外蛋白合成体系的建立和人工合成核酸技术（多核苷酸磷酸化酶）为基础： （1）以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽链的合成 （2）核糖体结合技术 4.1.1.1. 以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽链的合成 制备大肠杆菌的无细胞合成体系 在含DNA、mRNA、tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其他酶类的抽提物中加入DNase，降解体系中的DNA，耗尽mRNA时，体系中的蛋白质合成即停止，当补充外源mRNA或人工合成的各种均聚物或共聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板所决定。 因此，分析比较加入的模板和合成的肽链即可推知编码某些氨基酸的密码。 无细胞体系中Mg 2+浓度很高，人工合成的多聚核苷酸不需要起始密码子就能指导多肽的生物合成，读码起始是随机的。 然而，在生理Mg 2+条件下，没有起始密码子的多核苷酸不能被用作多肽合成的模板。 以多聚三核苷酸为模板时也可能只合成2种均聚多肽，以多聚（GUA）为例：??5‘……GUA GUA GUA GUA GUA……3’或5‘……UAG UAG UAG UAG UAG……3’或5‘ ……AGU AGU AGU AGU AGU……3’ 由第二种读码方式产生的密码子UAG是终止密码，不编码任何氨基酸，因此，只产生2种密码子GUA（Val）或AGU（Ser），所以合成的多肽要么是多聚缬氨酸，要么是多聚丝氨酸。 这个方法是以人工合成的三核苷酸如UUU、UCU、UGU等为模板，在含核糖体、AA-tRNA的适当离子强度的反应液中保温，然后使反应液通过硝酸纤维素滤膜。 发现，游离的AA-tRNA因相对分子质量小能自由通过滤膜，加入三核苷酸模板可以促使其对应的AA-tRNA结合到核糖体上，体积超