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题目：化学抑杀菌剂的效果评价 ——常用抗生素抗菌活性检测与评价 实验设计方案 一，实验器材，试剂与材料 器材：高压蒸汽灭菌锅，微波炉，三角瓶，试管，移液管，培养皿，涂布棒，烧杯，玻璃棒，镊子，报纸，线绳，试管塞 试剂：硫酸链霉素，福利平，生理盐水，NaOH溶液，PH试纸（酸，碱），HCl溶液 材料：大肠杆菌，白色葡萄球菌， 二,实验步骤 1，生理盐水的配制 取2.25克Nacl溶入247.75ml蒸馏水中，调PH为7，分装入试管2到8中，分别在2到5装入生理盐水的量为5毫升，7.5毫升，8.75毫升，9.375毫升，在7号试管中装入10毫升生理盐水作为对照，调各个试管PH为7，在6和8号试管中都装入7.5毫升盐水作为不同PH的抗生素浓度稀释用，分别调PH为6和8，在1号试管中装入10毫升硫酸链霉素母液，对标号为2’到8‘的试管采取相同的操作，在1’试管中装入10毫升利福平抗生素母液，包扎好待灭菌。 2，营养琼脂培养基的配制 用125毫升水溶解5g琼脂，另外125ml水依次溶解0.75克牛肉膏，2。5克蛋白胨，1.25克NaCl,溶解后混合均匀调PH7.0到7.2，分装入三角瓶中待灭菌。 3灭菌：将培养基，生理盐水，以及事先准备的68张直径13mm的小滤纸圆片放入高压蒸汽灭菌锅内121摄氏度灭菌20分钟。 4，稀释抗生素：依次用移液管从硫酸链霉素母液中取5毫升，2.5毫升,1.25毫升,0.625毫升放入2到5试管中，再从母液中取出2.5毫升放入6和8试管中，对1到8试管采取相同操作加入利福平抗生素 5，浸泡抗生素：在1到5支试管中分别加入4张滤纸片，浸泡半个小时后取出晾干。在6和8的试管中分别加入4张圆形滤纸，浸泡30分钟后晾干。在7试管放入12张圆形滤纸片浸泡30分钟取出晾干。对1’到8试管操作相同。 6，倒平板：在16个培养皿中各倒入15ml营养琼脂培养基。 7，在8个培养皿中接种大肠杆菌，其余接种白色葡萄球菌。涂布法接种0.2ml，用涂布棒涂抹均匀。 8，贴滤纸片：在相应的培养基上贴入对应的抗生素滤纸。 9，培养：把贴好滤纸的培养皿放入37摄氏度的环境中倒置培养24h. 9,观察结果：观察各个培养基上抑菌圈的有无及测量抑菌圈的大小。 实验培养基设计如图所示： 根据仪器的大小及实验的复杂度。我对实验设计做了一些调整，以便能顺利及时地完成实验，请组长考虑。十一组唐华丹。 鉴于减少实验所用仪器，我把抗生素的稀释方法改了一下，就可以少用移液管。