- 1、本文档共31页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
第一节 糖的定量测定 1.1 中性糖的测定 1.1.1苯酚-硫酸法 敏感度:1-60ug 葡萄糖的200ul溶液 方法:(1)制备5%的苯酚 (2)样品加入200ul苯酚(样品含有糖不超过100ug) (3)加入1ml浓硫酸 (4)静止10min后震荡混匀 (5)30min后,490nm下测定 1.1.2 Somogyi-Nelson法测还原糖 2Cu2++还原糖 Cu2O Cu2O+H2SO4 cu+ cu+ +MoO2-4 2Cu2+ + 蓝色溶液 敏感度:10-100ug 葡萄糖的1ml溶液 方法:(1)铜试剂A:25g无水碳酸钠,25g四水和酒石酸钾钠,20g碳酸氢钠和200g无水硫酸钠溶解在800ml蒸馏水中,溶解稀释1000ml,20℃以下保存 (2)铜试剂B:配制15%硫酸铜,每100ml溶液中加入1-2滴浓硫酸 (3)砷钼酸盐显色剂:溶解25g钼酸钠在450ml蒸馏水中,搅拌下加入21ml浓硫酸,加25ml砷酸钠溶液,混合后,37 ℃保温24h或55 ℃保温25min。 (4)1ml样品,加入1ml铜试剂(25mlA+1mlB),混匀,沸水加热20min,冷却至室温,加入1ml砷钼酸盐显色剂,蒸馏水稀释至25ml,560nm测定 1.1.3 蒽酮-硫酸法 敏感度:1-60ug 葡萄糖的200ul溶液 方法:(1)2g/L蒽酮试剂:溶解2g蒽酮于浓硫酸 (2)620nm测定 1.1.4 铁-苔黑酚法测定戊糖 敏感度:0.2-20ug 木糖的200ul溶液 方法:(1)10%W/V三氯乙酸溶液 (2)1.15%硫酸铁胺和0.2%苔黑酚的9.6M HCl溶液 (3)200ul样品中加入200ul样品(1),加热100 ℃,15min,冷却室温 (4)加入(2),混合,加热100 ℃,20min (5)冷却室温,660nm测定 1.1.5 苯酚-硼酸-硫酸法(测定酮糖) 敏感度:0.1-9ug 果糖的100ul溶液 方法:(1)2.5g的苯酚溶于50ml水,滴加入1ml丙酮,加入2g硼酸 (2)100ml样品,加入0.5ml试剂(1),加入1.4ml浓硫酸 (3)室温静止5min (4)37 ℃温浴1h (5)568nm下测定 1.1.6 己糖和6-脱氧己糖测定 方法:(1)硫酸试剂:6份硫酸加入1份水中(V/V),冷却 (2)半胱氨酸-苯酚溶液:含1%盐酸半胱氨酸和0.075%苯酚的水溶液 (3)0.25ml样品(2-8ug己糖和6-脱氧己糖)溶液,加入1.25ml硫酸,摇匀,浸入沸水3min,冰浴,加入0.25ml半胱氨酸-苯酚溶液,摇匀冰浴1h (4)己糖490测定 (5) 6-脱氧己糖398测定 1.1.7 葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖 方法:(1)葡萄糖氧化酶液(110u/ml):10ml (2)过氧化物酶:25mg溶于14ml水中 (3)联茴香氨:30mg溶于6ml,95%乙醇中 (4)Tris-甘油缓冲液(0.5mol/L,pH7.0的Tris缓冲液加等体积的甘油混合)70ml (5)混合4种成分,总体积100ml (6)2ml样品液加入试管,加入2ml葡萄糖氧化酶试剂,37 ℃水浴反应30min,加入4ml 2.5mol/L的硫酸终止反应,摇匀。 (7)525nm下测定 1.1.8 3,5-二硝基水杨酸法测还原糖 敏感度:5-500ug 葡萄糖的100ul溶液 方法:(1)0.25g 3,5-二硝基水杨酸,75g酒石酸钾钠溶于50ml 2M的氢氧化钠,用水稀释到250ml (2)100ul样品加入1ml (1) (3)加热100 ℃ ,10min (5)冷却至10min,570nm检测 1.2 酸性糖的测定 1.2.1 咔唑法测糖
您可能关注的文档
最近下载
- 默纳克3000+NEW新国标调试资料.pdf
- 四级书法考试卷子及答案.docx VIP
- 钢楼梯施工方案 .pdf VIP
- 2024中智集团招聘公开引进高层次人才和急需紧缺人才笔试参考题库(共500题)答案详解版.docx
- 浙江大学:内科学(二)试卷集锦.docx
- 2025包头市九原区公开招聘社区工作者后备库人员考前自测高频考点模拟试题含答案详解.docx VIP
- 3岁-6岁 绘本第1课 《萝卜回来了》-美术课件.ppt
- 华升富士达电梯ZEXIA型CP41板 IDU412电气原理图纸接线图纸.pdf
- 博易大师指标龙锁趋势王指标信管家指标公式高成功率.docx
- 2023-2024学年广西玉林市玉州区七年级下期末数学试卷附答案解析.pdf VIP
文档评论(0)