复方免疫活性因子.ppt

复方免疫活性因子的制备及其对奶牛隐性乳房炎的治疗效果观察 研究生 吴 辉 导 师 陈德坤 主要内容 一、 引言 二、 材料与方法（略） 三、 技术路线 四、 结果与分析 五、 讨论 六、 结论 引 言 奶牛乳房炎是一种危害极其严重的接触性传染病 该病主要由病原微生物感染而引起。是一种能够导致奶牛业最为严重经济损失的疾病。根据其有无临床症状可以将奶牛乳房炎分为临床乳房炎和隐性乳房炎两类，其发病率根据统计可高达70%，就连国外一些饲养条件和卫生条件良好的奶牛场中乳区感染率高达75%。目前全世界约有2.2亿头奶牛，其中约有1/3的奶牛患各种类型的乳房炎。美国每年因奶牛乳房炎造成的损失达20亿美元。全球每年因乳房炎引起的损失达到350亿美。 现阶段控制奶牛乳房炎困境 常用抗生素疗法的缺陷 目前对于奶牛乳房炎的治疗主要是抗生素疗法。利用抗生素控制侵入机体的病原微生物，这种方法的利用，在控制乳房炎、降低乳房炎的发病率方面,特别是在控制急性、多发性和亚急性乳房炎方面起到积极的作用。但是，由于抗生素疗法疗程较长，抗生素被大量应用，致使一些常见病原菌产生抗药性，耐药菌株大量出现，使得常用药物疗效下降；同时，大量使用抗生素后，乳汁中有大量抗生素的残留，直接影响到酸奶的制备，并可能出现耐药质粒的传递和转移，危害人类的健康。抗生素疗法无法对遭受到病原微生物破坏的乳腺细胞进行有效的修复，即使治愈了乳房炎，也无法使奶牛产奶量得到恢复，而乳房炎引起的损失的70%来自于各种奶牛乳房炎引起的产奶量下降。 现阶段控制奶牛乳房炎发展方向 非抗生素疗法的发展 为克服抗生素疗法的缺点，发展出以下多种控制方法，包括环境控制法、营养疗法、物理疗法、生物疗法。这些方法各有优缺点，免疫因子疗法由于免疫因子的固有可调节免疫的特点是其中非常具有发展前途的疗法。 免疫因子治疗乳房炎的原理 1.免疫活性因子能够促进乳腺内细胞MHCII类分子表达，促进抗原递呈和免疫应答 2.免疫活性因子增强乳腺中巨噬细胞、嗜中性粒细胞的吞噬力和杀菌力 3.免疫活性因子促进免疫细胞增殖分化，提高细胞毒作用，促进乳腺免疫应答 4.免疫活性因子对炎症介质进行调控，从而控制乳房的炎症过程 本次实验就是基于免疫活性因子的这些特点将其应用于乳房炎的治疗之中，以其达到良好的疗效。 研究意义 三、技术路线 1.免疫活性因子的制备及安全性和活性检验 2.免疫活性因子对奶牛乳房炎的临床治疗试验 免疫活性因子的制备和检验 透析法制备免疫活性因子 理化性质检验 安全性检验 ：毒性检验 、热源检验 免疫活性因子对外周血白细胞数量、吞噬功能及免疫器官重量的影响 免疫活性因子对奶牛乳房炎的临床治疗试验 1.用药种类及给药方法分类 2.效果分析 用药种类及给药方法分类 表1 三原县偃北奶牛厂用药种类及给药方法 表 2 阎良红星奶牛场用药种类及给药方法 表中“★”为肌肉注射、“☆”为乳房灌注；用药剂量为抗生素每个患病乳区200mg，肌肉注射量为四个乳区用药剂量只和，患病乳区不足四个的，按照四个乳区用药量给药。 治疗效果评价 通过CMT试剂检测，通过治疗前后数值结果变化判断乳房炎治愈率。 检测药物残留，鉴定生物安全性 测定产奶量变化，评价其经济性 四、结果与分析 1.免疫活性因子制备和检测结果、生物安全性 2.临床疗效、药物残留、产奶量变化 1.免疫因子的制备和检测 物理性状 得到比重为1.021的淡黄色，有特殊腥味的透明液体。 理化性质 PH为7.0，符合制剂要求；经紫外光谱分析，该制剂在250nm-260nm处有吸收高峰，A260nm/A280nm=2.28；用二羟基甲苯法测得核糖含量为33ug/ml；用双缩尿法测的多肽含量为315ug/ml；无菌检验、蛋白质检验、抗原检验及过敏实验结果均为阴性。 毒性检验结果表3 毒性检验结果 从表结果可以看出，制得的免疫活性因子分别在原液；浓缩2倍、5倍、10倍；稀释2倍、5倍、10倍的情况下，给小鼠腹腔注射，军无毒性反应。结论：用3.1.2.1方法制得的免疫活性因子对小鼠无毒性反应。 热源检查结果表4 热源检查结果 结论：制得的免疫活性因子不含热源物质。 免疫活性因子对小鼠血液白细胞数量的影响表5 免疫活性因子对小鼠血液白细胞数量的影响 分析：一次给予机体较大量的免疫活性因子，可以迅速提高机体内免疫细胞的数目，但是长时间使用，不会使血液内淋巴细胞的数量无限制的增高。上实验表明结果表明，给与小鼠复方免疫因子以后，血液中的免疫细胞会出现含量增多的现