小鼠瘦素受体(LEPR)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒).docVIP

小鼠瘦素受体(LEPR)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒) 仅供科研使用，不得用于临床检验。 小鼠瘦素受体（LEPR）酶联免疫试剂盒（ELISA 试剂盒）说明书 黄石市艾恩斯生物科技有限公司 【产品名称】 通用名称：小鼠瘦素受体（LEPR）酶联免疫试剂盒（ELISA 试剂盒） 英文名称：Mouse 【包装规格】 48 人份/盒，96 人份/盒 【预期用途】 仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠瘦素受体（LEPR）的浓度。 【检验原理】 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA） 。在预包被抗小鼠瘦素受体（LEPR） 抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入小鼠瘦素受体（LEPR）校准品和待测样本，再加入 另一株 HRP 标记的抗小鼠瘦素受体（LEPR）抗体（酶标抗体） ，经过温育与充分洗涤，去除未 结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B， 底物在 HRP 催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标 仪上测定吸光度（OD 值） ，吸光度（OD 值）与待测样品中小鼠瘦素受体（LEPR）的浓度正相 关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中小鼠瘦素受体（LEPR）的浓度。 【主要组成成分】 主要成分 组分 校准品 包被微孔板 HRP 标记抗体 底物液 A 底物液 B 20×浓缩洗涤液 说明书 自封袋 数量 0.5ml/管*6 管 96T 6mL 6mL 6mL 30mL 1份 1个 主要成分 抗原配制的 6 个浓度标准品 预包被固相抗体 HRP 标记的检测抗体 过氧化脲工作液 TMB 工作液 含 0.15%Tween20 的 PBS --Leptin R（LEPR）ELISA KIT 不干胶 2片 -- 校准品检测范围： 156-10000pg/ml。 校准品已经通过测试， 结果表明 HBs 抗原阴性， HIV1、 HIV2 和 HCV 抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照 具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。 需要但未提供的材料及耗材 1、酶标仪 2、精密移液器及一次性吸头 3、蒸馏水 4、洗瓶或者自动洗板机 5、37水浴锅或恒温箱 6、500ml 量筒 7、无粉一次性乳胶手套 【储存条件及有效期】 1、2-8保存，切勿冷冻，有效期 6 个月。 2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回 2-8冰箱。 3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和 HRP 标记抗体，有效期为 14 天， 其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。 【适用仪器】 半自动的酶标仪，如 Thermo MK3，或者国产酶标仪。 【样本要求】 样本类型和采集 以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。 1、细胞培养上清：4000rpm 条件下离心 20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在20以下，避免反复冻融。 2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm 条件 下离心 20min，小心地分离出血清，保存在- 20以下，避免反复冻融。 3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在 4000rpm 条件下，离心 20 分钟取上 清，血浆保存在-20以下，避免反复冻融。 仅供科研使用，不得用于临床诊断。 2 样本保存和稳定性 样本在 2-8条件下，可以储存 72h，或者在- 20储存 6 个月。样本收集后，不是一次 检测完，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分 解冻。 【检验方法】 试剂准备 1、使用前，所有的组分都要至少复温 30min，确保充分复温到室温。 2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使 结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按 1:20 稀释，即 1 份的浓缩洗涤液，添加 19 份的蒸 馏水。 3、底物：底物液 A 和 B，在使用前，按 1:1 体积充分混合，混合后 15 分钟内使用。 操作程序 1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。 2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。 3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 4、设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μ L，样本孔加 待测样本 50μ L，空白孔不加。 5、除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体 100μ L。 6、用封板膜盖住反应板，37水浴锅或恒温箱温育 60min。 7、揭开封板膜，弃去液体，吸水