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* 第二章 遗传的分子基础 通过前面的学习,我们知道基因存在于染色体上,也理解了基因与性状之间的关系。而基因的化学本质是什么呢?基因又是如何控制性状呢? 第一节 DNA 作为主要遗传物质的证据 DNA (1) 蛋白质(1.5 – 2.5) RNA (0.05) 从化学上分析,真核生物的染色体是由核酸和蛋白质组成的复合物。其中,核酸主要是脱氧核糖核酸(DNA),其次是核糖核酸(RNA),染色体蛋白质是由组蛋白与非组蛋白构成的。根据细胞的类型与代谢活动,非组蛋白的含量与性质变化较大。此外,还含有少量的拟脂与无机物质。 组蛋白 (1) 非组蛋白 (0.5 – 1.5) 染色体 上个世纪四十年代以来,由于微生物遗传学的发展,再加上生物化学、生物物理学以及许多新技术不断引入遗传学,1953年,沃森(J.D.Watson)和克里克(F.H.C.Crick)提出了DNA双螺旋结构模型,使遗传学研究从此深入到分子水平,促成了一个崭新的领域---分子遗传学的诞生和发展。分子遗传学已拥有大量直接和间接证据,说明DNA是主要的遗传物质,而在缺乏DNA的某些病毒中,RNA就是遗传物质。 一、DNA作为主要遗传物质的间接证据 遗传物质在理论上应当具备连续性、稳定性和自主性,才能满足生物遗传与变异的特性。目前发现绝大多数生物细胞中只有DNA具有这些性质。 同种生物的不同个体间,其细胞中DNA的含量具有稳定性; 同一个体不同组织的细胞间DNA的含量具有稳定性; 同一个体不同发育阶段,其细胞中DNA的含量也具有稳定性; DNA仅在能自体复制的细胞器上找到。 二、DNA作为主要遗传物质的直接证据 肺炎双球菌转化实验 肺炎双球菌(Diplococcus pneumoniae)有两种不同的类型:一种是光滑型(Smooth, S型),被一层多糖类的荚膜所保护,具有毒性,在培养基上形成光滑的菌斑;另一种是粗糙型(Rough, R型),没有荚膜和毒性,在培养基上形成粗糙的菌斑。 1928年,英国医生格里费斯(F.Griffith)首次将R型的肺炎双球菌转化为S型,实现了细菌遗传性状的定向转化。实验的方法是先将少量无毒的R型肺炎双球菌注入小鼠体内,再将大量有毒但已加热(65℃)、被杀死的S型肺炎双球菌注入。结果小鼠发病死亡。从死鼠体内分离出的肺炎双球菌全部是S型活细菌。在对照实验中,单独注射R型菌体或加热杀死的S型肺炎双球菌的小鼠都没有死亡(图8--1)。这一实验结果表明,被加热杀死的S型肺炎双球菌必然含有某种活性物质使R型细菌转化成活的S型细菌,这种活性物质必然具有遗传物质的特性。但当时并不知道这种物质是什么。十六年后,阿委瑞(O.T.Avery, 1994)等用生物化学方法证明这种活性物质是DNA。他们不仅成功地重复了上述的试验,而且将S型细菌的DNA提取物与R型细菌混合在一起,在离体培养的条件下,也成功地使少数R型细菌定向转化为S型细菌。其所以确认导致转化的物质是DNA,是因为该提取物不受蛋白酶、多糖酶和核糖核酸酶(RNase)的影响,而只能为DNA酶所破坏。 迄今,已经在几十种细菌和放线菌中成功地获得了遗传性状的定向转化。这些试验都证明起转化作用的物质是DNA。 图8-1 肺炎双球菌的转化试验 图8-2 T2 噬菌体颗粒结构示意图 噬菌体感染实验 噬菌体是极小的低级生命类型,必须在电子显微镜下才可以看到。其结构极其简单,只有一个蛋白质构成的外壳,分为多角形的头部和管状的尾部。头部外壳包裹着一条线形DNA。管状尾部具有收缩能力,用以附着在细菌表面(图8-2)。T2噬菌体的DNA在大肠杆菌内,不仅能够利用大肠杆菌合成DNA的材料来复制自己的DNA,而且能够利用大肠杆菌合成蛋白质的材料,来建造它的蛋白质外壳和尾部,因而形成了完整的新生的噬菌体。 Hershey等用同位素32P和35S分别标记T2噬菌体的DNA与蛋白质。因为P是DNA的组分,但不存在于蛋白质;而S是蛋白质的组分,但不存在于DNA。然后用32P或35S标记的T2噬菌体分别感染大肠杆菌,经10分钟后, 用搅拌器甩掉附着于细胞外面的噬菌体外壳。结果发现:在第一种情况下,放射性物质全部存在于细菌内而不被甩掉,并可传递给子代。在第二种情况下,放谢性物质大部分存在于被甩掉的外壳中,细菌内只有较低的放射性剂量,但不能传递给子代(图8-3)。这样看来,主要是由于DNA进入细胞内才产生完整的噬菌体。所以说DNA是具有连续性的遗传物质。 图8-3 噬菌体的感染试验 (三) 烟草花叶病病毒重建试验 烟草花叶病病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)是一种RNA病毒,不具有DNA。它的形状如图8-4,
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