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湖南永州职业技术学院 授课课时计划 教案编号：实训17 授课章节名称 实训十七 猪场抗体水平的监测与分析 授课教师 于桂阳 教研室主任 实训目的 通过实训，使学生掌握规模化猪场主要疫病的抗体水平的检测方法。 实训重点 实训难点 教学资源 多媒体 模型 标本 √实物 音像 √其它 教材和参考书 授课班次 授课日期 教学安排 课型（2课时）： 理论 √实验 见习 其它 教学方式： 讲授 √讨论 √指导 示教 其它 复习思考题 实施情况及分析 教学内容： 实训十七 猪场抗体水平的监测与分析 一实训目的通过实训使学生二三实训内容～～.5毫升（56℃水浴灭活30分钟～～微升微升微升微升20微升微升 5）判定方法和标准：先观察阴性血清对照孔和稀释液对照孔，红血球应全部沉入孔底，无凝集现象（—）或呈（+）的轻度凝集为合格；阳性血清对照应呈（+++）凝集为合格。 在以上3孔对照合格的前提下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“++”凝集的待检血清最大稀释度为其血凝效价（血凝价）。血清的血凝价达到1：16为免疫合格。 “-”表示红细胞100%沉于孔底，完全不凝集 “+”表示约有25%的红细胞发生凝集 “++”表示50%红细胞出现凝集 “+++”表示75%红细胞凝集 “++++“表示90—100%红细胞凝集 6）注意事项 ①勿用90°或130°血凝板，以免误判。 ②污染严重或溶血严重的血清样品不宜检测。 ③冻干血凝抗原，必须加稀释液浸泡7～④用过的血凝板，应及时冲冼干净，勿用毛刷或其他硬物刷洗板孔，以免影响孔内光洁度。 ⑤使用血凝抗原时，必须充分摇匀，瓶底应无血球沉积。 ⑥液体血凝抗原4～～⑦如来不及判定结果或静置2小时结果不清晰，也可放置第2天判定。 ⑧每次检测，只设阴性、阳性血清和稀释液对照各1孔。 ⑨稀释不同的试剂要素时，必须更换塑料咀。 ⑩血凝板和塑料咀洗净后，自然干燥，可重复使用。 2.2伪狂犬病乳胶凝集试验（LAT）操作方法（必做） 实验材料：伪狂犬病乳胶凝集抗原、伪狂犬病阳性血清、阴性血清、稀释液，玻片，溶液配制见附录E(标准的附录) 实训内容及操作步骤： 1）待检血清不须经热灭活或其它方式的灭活处理 2）将待检血清用稀释液作倍比稀释后，各取15μL与等量乳胶凝集抗原在洁净干燥的玻片上用竹签搅拌充分混合，在3—5分钟内观察结果；可能出现以下几种凝集结果，即： 100%凝集：混合液透亮，出现大的凝集块 75%凝集：混合液几乎透明，出现大的凝集块 50%凝集：约50%乳胶凝集，凝集颗粒较细 25%凝集；混合液浑浊，有少量凝集颗粒 0%凝集：混合液浑浊，无凝集颗粒出现 如出现50%凝集程度以上的（含50%凝集程度），判为伪狂犬病抗体阳性，否则判为抗体阴性。如为阴性，可用微量中和试验进一步检测。 五、实训报告 永州职业技术学院教案纸 《养猪与猪病防治》教案