毕业设计论文-樟树籽蛋白质的提取与分析.doc

武夷学院 毕业设计(论文) 樟树籽蛋白质的提取与分析 院 系 ： 武夷学院 专业（班级）： 生物技术及应用 姓名： 学号: 指导教师： 职称： 讲师 完成日期： 2011 年 6 月 3日 武夷学院教务处制 樟树籽蛋白质的提取与分析 摘要：植物蛋白的提取方法有等电点法 、离子交换法 及超滤法、乙醇沉淀蛋白法等 本实验采用了乙醇沉淀蛋白,其优点是避免蛋白质变性 ,尽可能减少杂质。本实验采用磷酸盐缓冲液溶解蛋白质再用乙醇为脱水剂破坏蛋白质胶体质点的水化层，使其沉淀析出进而对樟树籽蛋白进行提取,并用紫外光吸收法测定蛋白质的浓度,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量，对樟树籽蛋白进行分析 关键词：樟树籽，蛋白质，提取，分析 目录 1 前言 1 1.1 樟树籽简介 1 1.2油类作物蛋白提取方法 1 1.2.1水相萃取法 2 1.2.2有机相萃取法 2 1.2.3水相酶解法 2 1.3 蛋白质分析检测方法 3 1.3.1 Folin-酚试剂法(Lowry法) 3 1.3.2紫外吸收法 3 2 材料和方法 3 2.1材料 3 2.1.1实验材料 3 2.1.2试剂 3 2.2 器材 4 2.3 实验方法 4 2.3.1 提取方法 4 2.3.2 蛋白质分离方法 5 2.3.3蛋白质的定性 5 2.3.4蛋白质的等电点 6 2.3.5紫外光吸收法测定蛋白质浓度 6 2.3.6 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法—蛋白质的分子量测定 7 3 结果与讨论 9 3.1 前处理 9 3.2 蛋白质的提取 9 3.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法 10 4结论 11 参考文献 11 致谢 13 1 前言 1.1 樟树籽简介 樟树属樟科( Lauraceae)植物 ,是一种生长在亚热带地区四季常青的树种 ,在我国长江以南地区及台湾省有大量种植。樟树籽 ,又名樟犁、香樟子、大木姜子、樟子等，其氨基酸含量丰富 ,品质优良 ,但是、目前 ,樟树籽除极少量被采摘入药外 ,大部分均自生自灭 ,没有被很好地利用.由于食物资源供需矛盾的日益突出 ,开发利用新的蛋白质资源已成当务之急 ,尤其是植物性蛋白质源的开发利用已成为世界各国解决食物资源匮乏的重要突破口.大豆蛋白、 花生蛋白的应用已日趋普遍 ,但对樟树籽蛋白的利用还没有引起足够的重视，　　 樟树( Cinnamomum Camphora)是樟科属的常绿乔木植物 ,高20～30 m。主要生长在热带和亚热带地区 ,全世界有 45 个属约2 500余种 ,在我国有约 20 个属近 430 种 ,其中我国特有的有 355 余种 ,樟树是我国特产珍贵木材和经济林树种 ,被誉为江南宝树。樟树 3～4 月开花 ,花小呈绿色或淡黄色 ,长大约 2 mm ,花被 6 裂 ,椭圆形。花期能散发出淡淡的清香 ,这段时期大约一周至半月左右。每年 10～12 月樟树籽基本成熟 ,但这时的樟树籽很少自行脱落 ,其果皮依然是与叶面相同的绿色。再往后果皮的颜色逐渐加深 ,到第二年 1～2 月樟树籽果皮已由绿色逐渐变成棕黑色或黑色。樟树是樟科属的常绿乔木植物中经济价值最大的树种之一 ,是天然樟脑、芳香油、油脂、优质木材、医药等类的重要资源 ,其木材、根、叶、果实皆含精油 ,以往主要是对根、茎、叶进行利用与加工 ,近年来对樟树籽的利用研究增多 ,发现其核仁含脂肪油 ,含油率高达40 %以上。油脂中脂肪酸组成以 C10、 C12脂肪酸为主 ,占 90 %左右。 樟树籽 ,又名樟梨、香樟大木姜子、樟子等。成熟的樟树籽呈扁球形 ,直径大约5～9mm ,每千粒重大约是 200 g,果皮肉质薄 ,能散发出芬芳的清香。我国很早就将樟树籽作为药物用于治病 ,并认为樟树籽有驱风散寒、行气止痛之功效。癸酸(C10)已应用于医药行业合成鱼腥草素等消炎药 ,主要含有癸酸(C10)的樟树籽脂肪油已被试制成碳酸甘油脂 ,用于治疗脂肪代谢紊乱病症 ,并能降血脂及胆固醇。 1.2油类作物蛋白提取方法 油类作物蛋白营养价值和功能特性已被广泛接受，但国内外仍没有工业化产品。由于油类中抗营养因子的存在，过去很长一段时间内，油脂工业只注重油类作物榨油，忽略了油类作物蛋白的利用，造成植物蛋白资源的浪费。当今世界蛋白资源供求日趋紧张，所以，各国学者们开始转向油类作物蛋白的研究。目前，从油类作物中提取蛋白质的方法主要有以下几种。 1.2.1水相萃取法 水相萃取法是采用不同水相将菜籽蛋白提取，再分离(常用等电点法)，得到菜籽分离蛋白或者是通过水相将菜籽饼粕中硫苷、植酸、可溶性糖等非蛋白组分溶出，获得菜籽浓缩蛋白的方法。常用的水相有：水、稀酸、稀碱、NaCl溶液、六偏磷酸钠溶液等。刘大川等人(2005年)以脱皮脱脂双低菜籽粕为原料，在pH值