b7 h1pd 1在人结肠癌中的表达及其与调节性t细胞关系的研究word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 的 Na?ve T 细胞共培养，流式检测发现经诱导高表达 B7-H1 的单核细胞或结肠癌来源 的巨噬细胞组 T 细胞增殖功能(CFSEdim：30±5%)较对照组(Na?ve T 细胞单独培养组 CFSEdim：63±7%、癌旁正常组织与 Na?ve T 细胞共培养组 CFSEdim：55±8%)明显受 抑制，阻断 B7-H1 通路后受抑状态可以得到恢复（加入 B7-H1 阻断性抗体组 CFSEdim： 51±10%、加入 PD-1 阻断性抗体组 CFSEdim：54±11%）； 5. 流式细胞仪检测显示结肠癌组织中浸润的 TReg 较癌旁正常组织增多，Foxp3+ TReg 占 CD3+CD4+细胞中的比例分别为 18±5%和 5±3%； 6. Western Blot 检测从结肠癌组织中分选的 CD4+CD25+细胞比 CD4+CD25-细胞 表达的 IL-10 高；将健康人外周血液中分选的 CD4+CD25+和 CD4+CD25-细胞分别进行 体外培养并用 CD3、CD28 刺激 48 小时后，ELISA 检测发现 CD4+CD25+细胞组表达 IL-10 的浓度明显高于 CD4+CD25-细胞组，浓度分别为 180±27pg/ml、52±9pg/ml； 7. 分选肿瘤组织中 TReg 与健康人外周血单核细胞共培养，流式检测发现 TReg 与单核细胞共培养组 B7-H1 表达量（比例：28±3%；MFI：1200±80）明显高于对照 组（比例：5±1%；MFI：150±20）和加入 IL-10 拮抗性抗体组（比例：6±2%；MFI： 350±50）； 8. 将经 TReg 诱导高表达 B7-H1 的单核细胞与健康人外周血分选的经 CFSE 染 色的 Na?ve T 细胞共培养，流式检测发现经诱导高表达 B7-H1 的单核细胞组 T 细胞增 殖功能(CFSEdim：32±8%)较对照组(Na?ve T 细胞单独培养组 CFSEdim：60±7%、外周 血未经诱导的单核细胞与 Na?ve T 共培养组 CFSEdim：64±11%)明显受抑制，阻断 B7-H1 通路后受抑状态可以得到恢复（加入 B7-H1 阻断性抗体组 CFSEdim：52±8%、 加入 PD-1 阻断性抗体组 CFSEdim：55±5%）经 TReg 诱导高表达 B7-H1 是可以通过 B7-H1/PD-1 途径抑制 T 细胞增殖的。 结论：1. 结肠癌微环境中巨噬细胞高表达 B7-H1；结肠癌组织浸润性 CD8+T 细胞高 表达 PD-1；  2. 结肠癌微环境中 TReg 异常增高，且高表达 IL-10，结肠癌微环境中 TReg 可 以通过高表达 IL-10 促进巨噬细胞表达 B7-H1； 3. 结肠癌微环境中 B7-H1/PD-1 通路可以抑制 T 细胞的增殖能力，促进结肠癌 的肿瘤免疫逃逸； 4. 阻断 B7-H1/PD-1 通路可恢复结肠癌微环境中 T 细胞的增???能力，干预 B7-H1/PD-1 通路可能是将来辅助性免疫治疗结肠癌的方法之一。 关键词：结肠癌；B7-H1；PD-1；调节性 T 细胞；IL-10  The Study of B7-H1/PD-1 Expression and Relationship to Regulatory T Cells in Human Colon Carcinoma Abstract Objective: To investigate the level of B7-H1PD-1 expression in human colon carcinoma, and its correlationship with Regulatory T Cells (TReg) high infiltrated in tumor microenvironment? Method: Western Blot was used to investigate the expression of B7-H1 in colon carcinoma and its adjacent normal tissue, in which the expression of B7-H1 molecules on the surface of macrophages was measured by using flow cytometry as well. And also the cellular localization of PD-1+ T cells was detected by fluorescence immunohistochemistry. Using the flow cyt