dehp对大鼠孕酮合成及star p450scc基因表达影响的研究word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 武汉科技大学 研究生学位论文创新性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进 行研究所取得的成果。除了文中己经注明引用的内容或属合作研究共 同完成的工作外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写 过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文 中以明确方式标明。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名: 刻和必 日期: -z4ψf 功 研究生学位论文版权使用授权声明 本论文的研究成果归武汉科技大学所有，其研究内容不得以其它 单位的名义发表。本人完全了解武汉科技大学有关保留、使用学位论 文的规定，同意学校保留并向有关部门(按照《武汉科技大学关于研 究生学位论文收录工作的规定》执行)送交论文的复印件和电子版本， 允许论文被查阅和借阅，同意学校将本论文的全部或部分内容编入学 校认可的国家相关数据库进行检索和对外服务 。 论文作者签名: 指导敬师签名: 乡l}和部 安 及一 日期:兰 I ..)沙  摘 要 目的 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)的暴露对 青春期雌性大鼠孕酮分泌水平的影响，以及对孕酮合成的限速步骤——类固醇急 性调节蛋白（StAR）、胆固醇侧链裂解酶（P450scc）的基因表达的影响。通过对 青春期雌性大鼠短期染毒，对参与激素合成有关基因的表达水平进行分析，初步 探讨 DEHP 对雌性生殖毒性的可能机制。预期结果将为 DEHP 的生殖内分泌干扰 研究提供基础资料，为阐明环境内分泌干扰物的生殖内分泌干扰机制及其危害防 治研究提供重要的科学依据。 方法 1、取青春期的雌性 SD 大鼠 32 只，随机分到对照组和 DEHP（低、中、高） 三个实验组中，四个剂量组每组 8 只。按 10 mg/kg/d、100 mg/kg/d 和 1 000 mg/kg/d DEHP 分别对各实验组大鼠进行灌胃，并用溶剂(玉米油)作为对照为对照组进行灌 胃。 2、连续灌胃 10 天，采集大鼠的血液，分离血清，测定孕酮含量；取大鼠卵 巢组织提取总 mRNA ， 逆 转 录 PCR （ Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）分析测定 StAR 和 P450scc 基因表达水平。 3、应用 Excel 录入数据，统计学分析使用 SPSS19.0 进行，以 α=0.05 的检验 标准，判断差异是否具有统计学意义。 结果 1、模型效果 邻苯二甲酸单乙基己基酯(Mono-2-ethylhexyl phthalate，MEHP)是 DEHP 的初 级代谢产物，大鼠血清中 MEHP 含量随着染毒剂量增加呈上升趋势，说明动物染 毒成功。 I  2、大鼠体重和卵巢重量变化 随着染毒时间延长，各组大鼠体重均增加；随着染毒剂量的增高，体重增加 量 有 减 小 趋 势 。 随 着 染 毒 剂 量 的 增 加 双 侧 卵 巢 重 量 逐 渐 减 小 ， 高 剂 量 组 （1000mg/kg）与其他三组比较，卵巢重量减少有统计学意义（P?0.05）。 3、血清中孕酮的检测结果 低剂量组（10mg/kg）比对照组（0mg/kg）和中剂量组（100mg/kg）的血清孕 酮水平略高，但差异无统计学意义；高剂量组（1000mg/kg）血清孕酮水平明显高 于其他三组（P?0.01）。 4、各剂量组大鼠 StAR mRNA、P450scc mRNA 的相对表达量 随着染毒剂量的增加，StAR mRNA 和 P450scc mRNA 表达量降低，中剂量组 （100mg/kg）和高剂量组（1000mg/kg）与对照组比较，StAR 和 P450scc 的表达量 有显著减少（P?0.05）。 结论 1、DEHP 可能影响青春期大鼠卵巢的发育。 2、高剂量 DEHP 暴露可能增加血清孕酮水平。 3、DEHP 体内暴露可能降低 StAR mRNA 和 P450scc mRNA 的转录水平。 关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯；StAR；P450scc；孕酮 II  Abstract Objective To explore the effect of di-2-ethylhexyl phthalate(DEHP) exposure on the levels of progesterone in blood of rats and the expression of steroidogenic acute regulatory protein(StAR) mRNA and cytochome P450 cholesterol side cha