第三章--细胞生物学研究方法.pptVIP

1. Fluorescence Fluorescent Microscope Objective ArcLamp (弧光灯) Emission Filter Excitation Diaphragm(光圈) Ocular(目镜) Excitation Filter Fluorescence Microscope image of Hoechst stained cells (plus DIC) Image collected with a 470T Optronics cooled camera Fluorescent Microscope Objective Arc Lamp Emission Filter Excitation Diaphragm Ocular Excitation Filter Objective Laser Emission Pinhole Excitation Pinhole PMT Emission Filter Excitation Filter Confocal Microscope Confocal System Fluorescent image of paper Pine Tree pollen - collected on a Bio-Rad MRC 1024 at Purdue University Cytometry Laboratories 1为转GFP基因的烟草单细胞； 2为转SCaM1-GFP融合基因的烟草单细胞；3为转SCaM4-GFP融合基因的烟草单细胞。 质壁分离后转基因烟草单细胞的激光共聚焦显微镜观察 细胞壁 细胞膜 细胞核 细胞壁 细胞壁 细胞膜 细胞核 细胞膜 细胞核 细胞核 细胞膜 细胞壁 细胞核 细胞膜 绿色荧光蛋白 Six model organism E. coli S cerevisiae A. thaliana C elegans D melanogaster M musculus 模式生物所具备的共同特点* 适合于实验室内培养和进行各种处理 个体较小， 容易培养， 操作简单， 生长繁殖快 A comparison of yeast cells that were growing on the vaginal epithelium seen with different types of LM. a)under bright-field; b)phase-contrast; c)DIC Examples of negtively stained and metal-shadowed specimens. Electron micrographs of a tobacco rattle virus after negtive staining with potassium phosphotungstate(a) or shadow casting with chromium(b). 固定 ? 包埋 ? 切片 ? 染色 密度梯度离心： 连续密度梯度 不连续密度梯度 常用的介质： 蔗糖、氯化铯、甘油等。 Caenorhabditis elegans Drosophila melanogaster Arabidopsis thaliana Hela细胞（左）、CHO细胞（右）的培养 细胞融合： 两个或多个细胞融合成一个双核或多核细胞的现象。 同核细胞融合 异核细胞融合 第三章 细胞生物学研究方法 细胞生物学研究方法 进行初步观察 形成可验证的假说 设计试验 收集资料 解释结果 作出合理结论 查阅已 有知识 生物学研究模式生物 不同物种享有共同分子机制 如何学习细胞生物学？ 抽象思维与动态观点 结构与功能统一的观点 同一性(unity)和多样性(diversity)的问题 细胞生物学的主要内容： 结构与功能（动态特征）； 细胞的生命活动 ； 实验科学与实验技术——细胞真知源于实验室 ——What we know//How we know. 第一节 细胞形态结构的观察方法 第二节 细胞组分的分析方法 第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术 第四节 用于细胞生物学研究的模式生物 第一节 细胞形态结构的观察方法(注意分辨率的差异*) 1 光学显微镜技术（light microscopy） 2 电子显微镜技术 (Electron microscopy) 3 扫描遂道显微镜 (scanning tunneling microscope ) 一、光学显微镜技术（light microscopy)