GPC净化_气质联用法定量分析大米、瓜子、粉丝中石蜡含量.doc

GPC净化_气质联用法定量分析石蜡含量 沈涛， （嘉兴市农产品监测中心，浙江 嘉兴 314050） 摘要： 提出了凝胶渗透色谱（GPC）净化样品—气相色谱质谱联用法（GC-MS）定量分析大米、瓜子、粉丝中石蜡的含量。样品经索氏萃取后，利用凝胶渗透色谱技术去除样品中的油脂，净化液浓缩干后用乙酸乙酯∶环己烷（1∶1）溶解，通过DB-5ms石英毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）分离，采用电子轰击离子源选择离子检测模式进行质谱测定。结果显示，该方法的相对标准偏差（RSD）为2.3～4.7%，检测回收率为90～107%。 关键词：凝胶渗透色谱；气相色谱质谱联用法；大米、瓜子、粉丝；石蜡 中图分类号：×××××× 文献标识码：×××××× 1 引言 石蜡为一种矿物油，是石油分馏所得的产品，属非食用油脂，主要由正构烷烃ＣnＨ2n+2组成。石蜡经过长时间烧煮，会分解成更小的低分子化合物，对人体呼吸道造成不良影响，降低其免疫功能，使人容易患上气管炎、肺炎等疾病，或者通过呼吸道感染，引发体内各种脏器疾病。这些物质如果在人体内长期积蓄，还会引起人体细胞变异疾病，严重危害健康。长期服用石蜡还可导致食欲减退，对脂溶性维生素的吸收减少，并发生消化系统障碍。 由于目前国内学者对于食品中石蜡检测方法的研究大多集中在定性检测方法上，定量检测方法的研究报道不多。如廖怀平等[1]研究傅里叶红外光谱法定性检测火锅底料中非法掺入工业用固体石蜡的方法。毕艳兰等[2] 根据石蜡与食用油脂性质的差异，采用了薄层色谱法、皂化法、溶剂溶解法等对火锅底料中提取出来的油样进行定性分析比较。范璐等[3]采用索氏抽提法从整粒或粉碎大米中抽提粗脂肪，采用测定皂化值和不皂化物含量法确定大米表面的石蜡含量。郑卫东等[4]采用乙醚提取皂化的方式，分离出不皂化物，通过对不皂化物的红外光谱鉴别，建立了火锅底料中石蜡的定性检验方法。因此研究食品中石蜡含量的定量检测方法对于打击部分生产企业和不法分子非法使用石蜡作为食品添加剂具有重要意义。本实验以大米、瓜子、粉丝为研究对象，利用气相色谱质谱联用仪建立了食品中石蜡含量定性与定量检测方法。 2 实验部分 2.1仪器与试剂 Agilent 6890N-5973N气相色谱质谱联用仪；LC-Tech凝胶渗透色谱仪；Heidolph 4003旋转蒸发仪；梅特勒XS205十万分之一电子分析天平。 石油醚（分析纯）、乙酸乙酯、环己烷为色谱纯；市售石蜡（纯度大于98%），用乙酸乙酯-环己烷（50+50，V/V）配成1mg/mL标准储备液。 2.2色谱质谱条件 色谱条件：色谱柱：DB-5ms 30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度：280℃；程序升温：初始温度50℃，保持1min，以20℃/min升至180℃，保持1min，以15℃/min升至280℃，保持20min；柱流速：1.0mL/min；接口温度：280℃。质谱条件：电离能：70Ev；采集方式：选择离子扫描（SIM法），定量离子：366，定性离子：85、99、113；溶剂延迟：5min。 2.3样品处理 2.3.1提取 称取5.00g粉碎后的样品，加入100mL石油醚，50℃索氏提取4小时，转移至蒸发瓶中，50℃旋转蒸发干，用10mL乙酸乙酯-环己烷（50+50）溶解残渣，待GPC净化。 2.3.2净化 GPC净化条件：流动相乙酸乙酯-环己烷（50+50，V/V），流速5.0 mL/min，丢弃时间800秒，收集时间400秒。将收集到的溶液在50℃旋转蒸发干，用1.0mL乙酸乙酯-环己烷（50+50）溶解，旋涡混匀，待气相色谱质谱联用仪分析。 3 结果与讨论 3.1色谱质谱条件的确定定性与定量化合物的选择 气相色谱质谱联用分析方法的主要目的是目标化合物能在尽可能短的时间内得到完全分离，目标峰的理论塔板数能尽可能高，同时要明确目标碎片离子。因此，只有选择最佳的色谱和质谱条件，增加分离度，将分析物与干扰组分良好的分离，并且选择出合适的碎片离子才能准确地进行定量分析。 由于石蜡是由正构烷烃ＣnＨ2n+2组成，目标化合物均为非极性物质，我们采用非极性的DB-5ms 30m×0.25mm×0.25μm色谱柱，通过对程序升温条件、流速、进样口温度、接口温度等参数进行优化，由标准溶液色谱图（图1）可见，在35分钟内石蜡中的各种正构烷烃能全部出峰并且得到很好分离。 图1 石蜡标准溶液总离子流图 Figure 1 Standard Solution Total Ion Chromatogram of Paraffin wax 由图1可以看出正二十五烷、正二十六烷、正二十七烷、正二十八烷响应值最高，且未添加石蜡的大米、瓜子、粉丝样品的色谱图中上述四种化合物无响应，因此选择正二十