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* 种质的保存 种质的保存 第五组 07生物科学 保存技术分类 原地保存技术 异地保存技术 原地保存即在原来的生态环境中，就地进行自我繁殖保存种质。 原地保存被认为是生物多样性保护最为有力的和最为高效的方法，不仅保护了所在生境中的物种个体、种群和群落，而且还能维持所在区域生态系统中能量和物质运动的过程，保证物种的正常发育和种内遗传变异度。另外，它对林木种质资源长期保存也是一个理想的方法。 保存技术分类 原地保存技术 异地保存技术 异地保存技术 离体保存技术 离体保存是将单细胞、原生质体、愈伤组织、悬浮细胞、体细胞胚、试管苗等植物组织培养物储存在使其抑制生长或无生长条件下，达到保存目的的方法 特别适用于目前无方法进行长期保 存的无性繁殖植物和顽拗型种子植 物，用于保存的器官主要有种子、花粉、愈伤组织、枝条、芽即根等 离体保存 3 超低温保存技术 1 常温保存技术 2 低温保存技术 常温保存技术 降低培养基内的营养水平 在培养基中添加化学物质 提高渗透压，甘露醇、蔗糖等渗透物质能增加培养基的渗透强度 降低培养环境中氧气浓度或培养基中氧分压 胶囊化或脱水处理等 低温保存技术 低温保存是在低于正常培养温度下保存植物组织培养物的技术，该方法常结合改变培养基成分、控制光照等措施，以减缓保存材料的生长速度，延长继代时间，故又称小生长法。 超低温冷冻法 超低温保存是指在-80℃以下的超低温中保存种质资源的一整套生物学技术。 慢冻法 快速冷冻法 玻璃化法 干燥冷冻法 超低温常用的冷源：干冰（-79℃）、 深冷冰箱、液氮（ -196℃ ）、 液氮蒸汽相（-140 ℃ ） 慢冻法 慢冻是指以0.1~10℃ /min 逐渐降温( 一般1~2℃/min )从0℃降到-70℃左右，随即把材料放入-196℃的液氮中。 Kartha 发现，草莓生长点的降温速度必须严格控制在0.5~1.0℃/min 范围，否则存活率明显下降。但原生质体、悬浮培养细胞等细胞类型一致的培养物，采用这种方法效果很好 。 快速冷冻法 本法是将植物从0℃或其他预处理温度直接投入液氮。其降温速度在每分钟1000℃以上。在降温冷冻过程中，从-10℃到-140℃是植物体内冰晶形成和增长的危险温度区，在此以下冰晶不再增生。因此，快速冷冻成功的关键在于利用超速冷冻，使细胞内的水迅速越过冰晶生长的危险温度区。细胞内的水形成“玻璃化”状态。 快速冷冻法 采用快速冷冻方法要求：细胞体积小，细胞质浓厚，含水量低，液泡化程度低的材料。 该方法对高度脱水的植物材料，如种子、花粉及很抗寒木本植物枝条或冬芽较适宜，但对含水量较高的细胞培养物一般不适合 干燥冷冻法 是将植物材料置于27～29℃烘箱内，使其含水量由72-77%降至27-40%后，再浸入液氮，可以使植物材料免遭冻死。或利用无菌空气流、干燥硅胶、压缩空气流、饱和盐溶液或者饱和溶液表面的气相等对保存材料进行脱水处理, 然后快速将其侵于液氮中保存 玻璃化法 玻璃化法超低温保存是目前植物细胞和组织长期稳定保存的理想方法，能节省空间，避免污染和继代，克服体细胞变异，并且设备简单，操作简便。迄今，利用玻璃化法已成功保存了苹果、柑、葡萄、樱桃、石蒜、菊花等多种园艺植物的离体茎尖 。 应用前景 超低温技术已成功地应用于许多粮食作物、蔬菜、果树、观赏植物和药用植物种子、花粉、试管苗等种质材料的保存。它对花粉和顽拗型种子保存具有十分重要的作用。 * * * * * * *