白腐菌漆酶降解染料研究进展.docVIP

白腐菌漆酶降解染料的研究进展 　　摘要：染料是一种重要的环境污染物，可通过食物链直接或间接影响人们的身体健康。本文概述了近年来白腐真菌漆酶对染料降解的研究进展，重点介绍了漆酶性质和来源、漆酶作用机理、漆酶对染料的降解特性，并指出其中存在的问题。 　　关键词：漆酶；染料；降解；白腐菌 　　中图分类号：Q939.98 　　文献标识码：A 　　 　　染料废水主要来自于纺织印染工业和染料生产行业。随着染料生产与印染工业的发展，其生产废水已成为当前最主要的水体污染源之一。目前世界染料年产量约为8×105－9×105t，我国染料年产量达1.5×105t，位居世界前列，在染料的生产和使用中约有10％～15％的染料随废水排入环境，严重地破坏了水生生态系统，因此亟待寻找高效环保的降解染料或处理染料废水的方法。大量的研究报道表明，白腐菌对染料具有很强的脱色作用，其脱色机制，除开一小部分为吸附脱色外，大多数是通过木质素降解酶系对染料的降解。由于白腐菌生长缓慢，受外部环境影响较大，因此科研工作者试图使用白腐菌的降解酶系来直接处理染料废水。在白腐菌的降解酶系中，木质素过氧化物酶和锰酶的催化反应需要过氧化氢来启动反应，而漆酶是一种氧化还原酶，其作用主要是催化氧化还原反应，能把分子氧直接还原为水，在没有过氧化氢和其它次级代谢产物存在下，可催化大量的酚类和芳香胺类化合物的氧化。因此，在白腐菌的降解酶系中，漆酶受到更多的关注。 　　 　　1　漆酶性质和来源 　　 　　漆酶(Laccase，E.C.1.10.3.2)是一类含铜的氧化还原酶，它能催化多种芳香族化合物(特别是酚类化合物)发生氧化反应，而在反应中分子氧作为电子受体被还原成水。漆酶广泛存在于真菌中，分泌漆酶的真菌主要集中于担子菌亚门(Basidiomy-cotina)、子囊菌亚门(Ascomyeotina)及半知菌亚门(Deuteromycotina)等高等真菌，其中最主要的是担子菌亚门的白腐真菌。 　　漆酶一般以单蛋白体的形式存在，其分子量一般在52kDa到110kDa之间，也有些分子量大于110kDa。漆酶分子中一般含有四个铜离子，根据光谱和磁性特征可将其分成三类：1型Cu2+和Ⅱ型Cu2+各一个，是单电子受体，呈顺???性，可用顺磁共振(ESR)测定；Ⅲ型Cu2+两个，是双电子受体，反磁性，ESR检测不出来。 　　不同来源的漆酶具有不同程度的糖基化，糖基化程度在10％～45％之间，一般情况下真菌漆酶的糖基含量要低于植物漆酶。漆酶是一种含铜的糖蛋白，肽链一般由500个左右氨基酸组成。糖组成包括氨基己糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、岩藻糖和阿拉伯糖等。由于分子中糖基的差异，漆酶的分子量会随来源不同有着很大的差异，甚至来源相同的漆酶分子量也不会完全相同。漆酶蛋白质部分一般含有一段大约520～600个氨基酸单一多肽序列，其中含19种氨基酸：Asp，Thr，Glu，Set，Pro，Gly，Ala，Val，Cys，Met，Ile，Leu，Tyr，Gin，Phe，Lys，His，Arg，Try。漆酶在和铜原子连接的半胱氨酸和10个组氨酸之中或周围都有严格的保守氨基酸残基，任何情况下这些氨基酸都分布在含有两对组氨酸残基的N－末端区域，或是分布于C－末端的半胱氨酸和其余的组氨酸残基之间。 　　漆酶能催化许多化合物的氧化反应，底物比较广泛，包括许多与对二酚结构类似的化合物，如氨基苯酚，邻、对苯二酚，多酚，多胺，木质素和芳基二胺等。一些漆酶能高效地氧化抗坏血酸，另外一些真菌漆酶还能催化木质素和甲氧基酚酸的脱甲基反应。必须注意的是过氧化物酶和其他一些多酚氧化酶也可以催化类似的反应，但这些酶不会利用分子氧作为第二底物，因此测定催化反应中氧吸收速率可以作为漆酶活性的可靠证据。漆酶的抑制剂大多是铜离子螯合剂，有卤化物、半胱氨酸、EDTA和SDS等，离子强度的不同也会影响酶的活力。 　　多数真菌漆酶的最适反应温度较低，一般在25℃～50℃之间，现在也有较耐高温真菌漆酶的报道，Marsmius quercophilus漆酶在75℃条件下半衰期为10min。多数真菌漆酶的最适反应pH在4.0～6.0之间。刘淑珍等研究发现，一种担子菌漆酶最适反应pH为2.2～2.8；新鲜香菇子实体漆酶的最适反应pH为2.6；刘尚旭等研究的糙皮侧耳Ax3所产漆酶的最适反应pH为2.8；杏鲍菇漆酶的最适反应pH为3，在pH2.5～4.0时酶活较大。同一种漆酶的作用底物有所不同，其最适pH也有差异。蝶形斑褶菇(Panaeolusp apilionaceus)漆酶POXB和POXD以ABTS为底物时的最适反应pH均在2.5左右，而以2，6一二甲氧基苯酚为底物时，最适反应pH分别为6.0和7.0。 　　 　　2　漆酶作用机理