视网膜色素上皮细胞移植术后免疫排斥相关问题探讨.docVIP

视网膜色素上皮细胞移植术后免疫排斥的相关问题探讨 　　[摘要] 视网膜色素上皮细胞(RPE)移植在动物实验中已取得大量成功，并正逐步向临床应用方面过渡，但移植后相关免疫排斥以及细胞凋亡所致一系列问题不容忽视，免疫排斥反应已成为RPE移植成功的最大障碍，且主要是慢性排斥反应。近年在该方面进行的研究已逐步深入，大量研究为防治移植后免疫排斥问题提供了可靠的实验室依据和应用前景，以期在不远的将来RPE移植能够成功地应用于人类RPE相关疾患的治疗。 　　[关键词] RPE移植 免疫排斥 　　 　　视网膜色素上皮细胞是血―视网膜屏障的组成成分，在维持视网膜光感受器细胞的新陈代谢如转运、储存、吞噬及分泌等生理功能方面具有重要意义。老年性黄斑变性及Stargard氏病等视网膜相关疾患正逐渐成为人类的主要致盲眼病，RPE移植术的开展，为临床治疗该类疾病提供了新的途径。但移植后相关免疫排斥以及细胞凋亡所致一系列问题不容忽视。 　　 　　1 免疫排斥反应的诱因 　　 　　Crafoors等[1]认为曾被视为免疫赦免区的视网膜下腔并不能完全逃避免疫排斥反应。Berglin等[2]发现在猴和人接受同种异体视网膜色素上皮细胞移植后会出现免疫排斥反应。尽管正常视网膜下腔存在一定的免疫赦免，但在移植时，血-视网膜屏障遭到破坏，该免疫赦免状态就会消失，将同种异体组织移植到视网膜下腔是否会触发更为迅速的免疫排斥反应，还需进一步证实。 　　 　　2 免疫排斥反应的表现 　　 　　移植后免疫排斥反应多发生于术后1―3个月或半年内不等，免疫排斥反应一旦发生，不仅可以影响移植物在视网膜下腔长期存活，而且会导致移植区出血、血-视网膜屏障破坏等。眼底镜下见标记的移植物随时间延长逐渐缩小，周围视网膜出现反光环或局部视网膜水肿，局部视网膜脱色素，并出现视力下降。眼底血管荧光造影显示移植区荧光渗漏。超微结构观察可见淋巴细胞、中性白细胞和吞噬细胞浸润，RPE细胞被吞噬分解，细胞数量减少，细胞质内的色素颗粒被释放分解而弥散在视网膜下腔，感光细胞排列紊乱并有变性坏死。 　　 　　3 免疫排斥反应的可能机制 　　 　　3.1 视网??组织的免疫原性：Jiang[3.4]，Grisanti[5]等发现，将体外培养的RPE 细胞移植于同种异体结膜下，可引起免疫排斥反应，使移植的RPE细胞被破坏。但如果将同种异体RPE移植片置于前房或视网膜下腔则可诱导机体出现免疫偏离，使全身性迟发性超敏反应被抑制。这显然是由于供体组织表达了可使受体致敏的同种异体抗原，而免疫偏离的发生也具有抗原特异性，因此，作为异体移植的材料，RPE细胞具有明显的免疫原性。RPE细胞移植排斥反应主要由MHC系统决定，在人类为HLA系统，研究表明RPE细胞基础性表达MHCⅠ类抗原，而不表达MHCⅡ类抗原，但体外培养的RPE受IFN-γ刺激后可表达MHCⅡ类抗原。Rezai等（1997）[6]采用流式细胞仪对体外培养的人胎儿RPE细胞的免疫原性也进行了研究，发现RPE细胞MHCⅠ类分子和细胞间黏附分子ICAM-1的表达水平较低，但是IFN-γ可上调MHCⅠ类分子和ICAM-1的表达，并诱导MHCⅡ类分子和血管细胞黏附因子VCAM-1分子的表达。显然RPE细胞对移植免疫的影响并不是一成不变的，它可受外界因素的刺激而改变。 　　3.2 基本原理：视网膜移植的免疫排斥反应源于宿主CD4＋T淋巴细胞对异体移植物的识别，这种识别过程需要抗原呈递细胞在适当的协同刺激分子和细胞因子的共同作用下完成。在RPE移植中，宿主CD4＋T淋巴细胞主要通过两条途径识别异体抗原：（1）异物被移植的RPE细胞自身呈递而不需要宿主抗原呈递细胞参与（直接途径）；（2）移植细胞的MHCⅡ类异体抗原分子被宿主的抗原呈递细胞呈递（间接途径）。正常情况下视网膜下腔缺乏巨噬细胞、郎罕细胞及B淋巴细胞等宿主专职抗原呈递细胞，因而抗原呈递只能由RPE细胞本身或宿主非专职抗原呈递细胞来完成。 　　3.3 主要机制：Liverside等[7]认为RPE细胞在特定情况下可以像抗原呈递细胞（APC）那样参与免疫应答和炎症反应。Penfold等[8]发现视网膜小胶质细胞具有与树突状细胞相似的特征，可进行抗原呈递。 此外，在某些情况下脉络膜的树突状细胞和巨噬细胞也可对移植的RPE细胞MHCⅡ类抗原分子进行呈递。Osusky等[9]发现体外培养的RPE细胞在IFN-γ作用下可表达MHCⅡ类分子并能够向T淋巴细胞提呈微生物抗原。RPE移植出现排斥反应时，眼内多种细胞可以分泌细胞因子来调节MHCⅡ类分子的表达，并充当抗原呈递细胞： Mǔller细胞可以分泌IL-1，小胶质细胞也可通过产生IL-6影响T细胞的趋化性[10]。Mǔller细胞或小胶质细胞可分泌I