dtaif1在乳腺癌细胞mdamb231激活过程中作用word格式论文.docx

表达抑制对 cyclin D1 表达的影响刚好相反。紧接着，我们检测了 DT/AIF-1 对调控cyclin D1 表达的 NF-κB 转录活性的影响。结果显示 DT/AIF-1 过表达细胞中 NF-κB 的活性明显高于野生型细胞和 DT/AIF-1 表达抑制细胞。而且当用 10%FBS 刺激细胞 0.5 小时后，这种差异更加显著。再 有 ，我 们 探索 了 DT/AIF-1 对 细 胞 分 泌活 动 的影 响 。结 果表明 ， 培养 过 pcDNA-DT 转染细胞的条件培养基中的细胞因子成分多于空质粒 pcDNA 转染对照细 胞。而且与对照组条件培养基相比较，这种条件培养基可以促进野生型 MDA-MB-231 增殖。通过 LC-MS-MS 鉴定，我们发现条件培养基中含量增加的一个成分是 14-3-3δ。 经 RT-PCR 检测发现， pcDNA-DT 转染细胞中 14-3-3δ 在 mRNA 水平的表达明显高 于野生型细胞和 DT/AIF-1 表达抑制细胞。最后，我们观察了 DT/AIF-1 对 MDA-MB-231 在裸鼠皮下形成肿瘤的影响。结 果显示，皮下接种 10 周以后，DT/AIF-1 过表达细胞在所有 8 个被接种裸鼠皮下均形成肿瘤，而仅有 50% 接种空质粒转染细胞的裸鼠在皮下形成可见肿瘤。另外， DT/AIF-1 过表达细胞所形成的肿瘤明显大于对照细胞。通过进一步检测肿瘤组织中 反映细胞增殖状况的两个指标——cyclin D1 和 Ki67——的表达，结果显示，DT/AIF-1 过表达肿瘤组织中 cyclin D1 和 Ki67 的表达明显多于空质粒转染对照组。上述研究结果表明：1，DT/AIF-1 可以促进乳腺癌细胞 MDA-MB-231 增殖，这 主要与它可以激活 NF-κB/cyclin D1 信号通路，从而促进细胞进行有丝分裂有关。2， DT/AIF-1 可以增强 MDA-MB-231 的分泌活动，而且这种分泌活动的增强有利于肿瘤 细胞的增殖。值得注意的是，DT/AIF-1 可以促进 14-3-3δ 在 MDA-MB-231 中的表达 与分泌。由于 14-3-3δ 是一个与细胞的增殖，迁移以及分泌活动密切相关的伴侣分子， 因此，上述结果提示 DT/AIF-1 对肿瘤细胞增殖以及分泌活动的影响很可能与 14-3-3δ 有关。3，DT/AIF-1 可以促进 MDA-MB-231 在裸鼠皮下形成肿瘤，表明 DT/AIF-1 是有利于肿瘤细胞在体内的生存以及增殖的。综上所述，DT/AIF-1 在乳腺癌细胞 MDA-MB-231 的激活过程中发挥重要作用。 关键词：DT/AIF-1; 乳腺癌; 增殖; 分泌活动; NF-κB; 14-3-3δAbstractDaintain/AIF-1 (DT/AIF-1) is a polypeptide closely associated with inflammation. Our previous study showed strong positive expression of DT/AIF-1 in breast ductal tumor epithelia, but only weakly positive or negative expression in the adjacent histologically normal ductal epithelia, suggesting that DT/AIF-1 is involved in the progression of breast cancer. However, the underlying mechanism is not clear. It is reported that DT/AIF-1 can promote proliferation, migration and secretion of macrophages and T lymphocytes, indicating that DT/AIF-1 plays a critical role in activation of macrophages. Recently, much research shows that macrophages play an important role in the initiation and metastasis of tumors. It is speculated that DT/AIF-1 participates in the progression of breast cancer via activation of macrophages. However, it is not c