endostar对大鼠walker256移植瘤淋巴转移的影响word格式论文.docx

主要缩略语英文索引缩略词MVD HEVEndostarWalker-256英文全称microvessel density high endothelial venulerh-endostatin injection，Walker-256中文全称微血管密度高内皮小静脉重组人血管内皮抑素注射液，商品名：恩度Walker-256 乳腺癌细胞株MLDmicrolymphaticvessel density微淋巴管密度PBSphosphate buffered saline磷酸盐缓冲液HEhematoxylin andeosin苏木精-伊红CD34Anti-CD34，高度糖基化跨膜糖蛋白，血管内皮标记D2-40lymphatic vessel endothelial氧连接型唾液酸糖蛋白,淋巴管内皮特异标记SPstreptavidin-perosidasSMskip metastasis链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法跳跃性转移1Endostar对大鼠Walker-256移植瘤淋巴转移的影响摘要目的：1.通过观察Endostar对大鼠Walker-256移植瘤腘窝转移淋巴结微血管及微淋巴管生成的影响，探讨Endostar在大鼠移植瘤腘窝淋巴结转移中的作用。2.通过对大鼠Walker-256移植瘤腘窝转移淋巴结及人乳腺癌腋窝转移淋巴结微血管与微淋巴管双标免疫组化，探索淋巴道转移与血行转移之间的关系。3.通过结扎大鼠Walker-256移植瘤腘窝转移淋巴结输出淋巴管、完全结扎淋巴结的出入血管和淋巴管，探索结扎后对淋巴结转移的影响。方法：1.取30只SD大鼠随机分成3组，每组10只，第1组为正常组，第2组为足底接种肿瘤并予Endostar干预组，第3组为足底接种肿瘤无Endostar干预组。予以第2、3组大鼠双侧足底注射Walker-256细胞建立移植瘤并腘窝淋巴结转移模型，1周后移植瘤成活并淋巴结肿大，开始予以第2组用Endostar 0.75mg/Kg 腹腔注射，第3组用生理盐水腹腔注射，均持续4周，用药完成1周后取出3组大鼠腘窝淋巴结。取第2、3组大鼠腘窝淋巴结HE染色计算转移率。选择第2、3 组大鼠腘窝转移淋巴结及第1组大鼠腘窝淋巴结，分别予D2-40及CD34行单标免疫组化染色，计算MVD与MLD。2.选择第2、3组大鼠腘窝转移淋巴结及第1组大鼠腘窝淋巴结，予D2-40及CD34行双标免疫组化染色观察微血管与微淋巴管可能存在的吻合。选择30例乳腺癌腋窝转移淋巴结标本，行D2-40与CD34双标免疫组化染色。3.取20只SD大鼠，右后足足底注射Walker-256细胞建立移植瘤并腘窝淋巴结转移模型，10天后随机分成两组，实验组（第4组）结扎腘窝淋巴结输出淋巴管，对照组（第5组）为假手术组，6周后分别取两组大鼠肺组织HE染色观察两组大鼠肺部转移率。4.取20只SD大鼠，双侧后足足底注射Walker-256细胞建立移植瘤并腘窝淋巴结转移模型，2周后随机分成两组，实验组（第6组）截肢切除足部病灶，保留2淋巴结并结扎淋巴结出入血管、淋巴管；对照组（第7组）截肢根治性切除足部病灶，清除腘窝淋巴结；8周后取两组大鼠残肢肢端HE染色观察局部复发率。结果：1.Endostar干预组与无Endostar干预组大鼠Walker-256移植瘤腘窝淋巴结转移率分别是60%、100%，两组转移率有统计学差异（p﹤0.05）；正常组、Endostar 干预组、无Endostar干预组腘窝淋巴结MVD分别是5.56±0.79，12.33±2.10，19.65±3.10，各组之间MVD均有统计学差异（p﹤0.05）；正常组、Endostar干预组、无Endostar干预组腘窝淋巴结MLD分别是6.46±2.20，10.45±2.76、12.39±2.20，各组之间MLD均有统计学差异（p﹤0.05）。2.正常组大鼠腘窝淋巴结、Endostar干预组及无Endostar干预组大鼠Walker-256移植瘤腘窝淋巴结内微血管与微淋巴管吻合率分别0%、25%、8.3%,各组吻合率差异有统计学意义（p﹤0.05）。人乳腺癌腋窝转移淋巴结内微血管与微淋巴管吻合率为16.7%。3.大鼠Walker-256腘窝转移淋巴结输出淋巴管结扎组与未结扎组肺转移率分别为70%与90%，两组比较无统计学意义（p＝0.582）。4.截肢切除足部病灶并完全结扎淋巴结血管淋巴管组大鼠与截肢根治性切除足部病灶清除腘窝淋巴结组大鼠8周后局部复发率均为0，结扎淋巴结结构消失。结论：Endostar可抑制大鼠Walker-256移植瘤腘窝转移淋巴结微血管和微淋巴管生成，抑制移植瘤腘窝淋巴结转移；2.大鼠Walker-256移植瘤腘窝转移淋巴结及人乳腺癌腋窝转移淋巴结内微血管与微淋巴管可能存在交通吻合。关