fgf2抵抗内质网应激诱导的细胞凋亡的机制分析word格式论文.docxVIP

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在 文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名： 日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□ ，在年解密后适用本授权书。不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日摘要随着环境的恶化和社会压力的增加，癌症、精神类疾病和神经退行性疾病成为 危害人类健康的主要疾病，在对这些疾病的研究中，我们虽然取得了很大的进展， 但是仍然有许多问题亟待解决，所以与癌症、精神类疾病和神经退行性疾病密切相 关的细胞凋亡与抗凋亡的研究一直都是领域内研究的热点。在以往的研究中已经发现 FGF-2是一种重要的多效因子，在相当多的研究报告 都阐明了 FGF-2与肿瘤和癌症细胞，特别是肝癌细胞的增殖、迁移，以及肿瘤和癌 症细胞对化学药物和放射性治疗的抵抗作用有极为密切的关系。而随着对内质网应激研究的不断深入，研究也已经表明了一些与人类密切相关 的疾病，神经退行性疾病（老年痴呆症、帕金森症），糖尿病，特别是癌症的发生、 发展都与内质网应激有着密切的关系，其中一些机制已经得到了阐明，但是目前对 真核细胞内质网应激的认识仍然有许多不清楚和有待解释的地方。针对 FGF-2和内质网应激的研究成果都显示它们都与癌症和神经退行性疾病密 切相关，那么 FGF-2与内质网应激之间的关系到底是怎么样，其中的机制如何？以 有的文献中没有深入的报道。我们的研究的目的就着眼于揭示 FGF-2和内质网应激 之间的关系，初步厘清其中的机制。本研究在前人研究的基础之上，着重研究了 FGF-2（basic FGF）对于化学药物 在肿瘤细胞上引起的通过内质网应激产生的凋亡的影响。本研究选择了一个常用的 肿瘤细胞系肝细胞癌细胞系 HepG2和人乳腺癌细胞系 MCF-7作为研究材料，采用衣 霉素（Tunicamycin/Tm）和毒胡萝卜素（Thapsigargin/Tg）来诱导其产生内质网应激， 我们采用了放射性同位素摄入法、特异性的荧光染料染色和流式细胞法来检查各种 不同的状态下 HepG2和 MCF-7细胞的情况，我们发现了 FGF-2对肿瘤细胞 HepG2和 MCF-7的保护效应，我们采用了 western blot 的方法，检测了一系列与内质网应激相 关的信号通路和关键蛋白的表达量和磷酸化水平变化，初步说明了这一保护效应相 应的作用机理。我们还构建关键蛋白的高表达稳定细胞系，在此基础上检测了相关信号通路的变化，我们还采用了 SiRNA 技术对信号通路上的关键蛋白进行了know-down 操作，由稳定细胞系以及 SiRNA 的结果我们确定了 FGF-2对肿瘤细胞 HepG2的保护效应中的关键蛋白，我们的研究展现了内质网应激反应信号通路与 FGF-2之间的存在对话，通过对这种机制和细节的研究从而从一个方面阐明了内质网 应激和 FGF-2与肿瘤和疾病发生有着密切的关系，对于揭示癌症的发生发展过程的 机理以及治疗有着重要的意义。关键词：内质网应激； 细胞凋亡； FGF-2； 肝癌； NckAbstractResearchers reported that a cytoprotective signal transduction pathway known as the “unfolded protein response” or UPR，activated by ER stress，contributes to survival orgrowth of the cancer cells ,such as Hepatocellular carcinoma cell. we knew that Basic fibroblast growth factor, FGF-2，a multi-effect grow factor， is associated with poorprognosis of liver cancer, but there was little information on function of FGF-2 in ER stress. In this study, we found that FG