HPLC_110709_24常见问题.ppt

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2018-05-17 发布于四川
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HPLC_110709_24常见问题.ppt

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四、色谱定量分析中常见问题及其解决方法： 1、峰形问题、坏柱； 2、样品超载、溶剂与样品不相配； 3、柱外效应与强保留基质、次级保留效应； 4、不合适的缓冲液、其它效应； 5、保留时间改变； 6、液相色谱方法的建立； 1、峰形问题、坏柱拖尾分叉柱压升高 2、样品超载、溶剂与样品不匹配样品超载溶剂与样品不匹配 3. 柱外效应与强保留基质、次级保留效应柱外效应解决方法：加入流动相改良剂反相色谱：加胺盐（10mM三乙胺，针对碱性组分）与有机酸（1%醋酸，针对碱性组分）正相色谱：类似反相色谱，加0.1%三乙胺（对碱性组分）与0.1%醋酸（对碱性组分）离子交换色谱：增加缓冲液和盐的浓度，提高pH 4、不合适的缓冲液、其它效应；不合适的缓冲液 5、保留时间改变 Any question ? 高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）高效液相色谱定量分析中常见问题及其解决方法处理：冲洗与倒柱换烧结过滤片补柱头凹陷报废强溶剂溶解样品的影响 a）乙腈溶解； b) 流动相溶解强保留基质次级保留效应原因：离子交换效应痕量金属 A. 假拖尾 ——峰未分开 B. 前沿峰 ——温度、样品溶剂、柱头塌陷或滤片阻塞 C. 宽峰 D. 伪峰样品反应进样前的反应分离时的反应梯度洗脱中的反应强溶剂溶解样品的影响 a）乙腈溶解； b) 流动相溶解