紫草静脉注射乳剂的制备.ppt

紫草静脉注射乳剂的制备 关杜 指导教师：逄秀娟 前言 静脉乳剂具有一定的淋巴定向输送和靶向定位作用。脂肪乳能增加难溶性药物的溶解度和稳定性，可减轻刺激性和毒副作用。将紫草中的有效成分提取出来后，制成静脉乳剂，以期望达到治疗癌症和保肝降糖的作用并提高其生物利用度。 本文建立HPLC法测定左旋紫草素的含量，摸索出紫草静脉注射乳剂的处方，并将提取物制成制剂，确定最佳处方。 对其稳定性的考察，疗效与药理作用的确定还有待于进一步的研究。 第一部分　紫草分析方法的建立 紫外分光光度法 参照中国药典2000年版（一部）关于紫草的含量测定，制定紫草提取物总色素的含量测定方法：精密称取0.010g紫草提取物，置于100ml 容量瓶中，加乙醇至刻度，过滤，取续滤液5ml，置于25ml容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用紫外分光光度法（中国药典2000年版附录 ）测定含量（λmax＝516nm ，E1%1cm=242,以左旋紫草素计）。此法用于测定紫草提取物总色素的含量。 高效液相色谱法 １色谱条件 　色谱柱：C-18柱；流动相：甲醇-　　　　　0.025mol/l磷酸（80：20）；柱温：室温；流速：1.0ml/min；测定波长： 516nm。 图谱如下图： ２ 对照品溶液的配置 精密称定5.5mg左旋紫草素对照品置10ml容量瓶中，用甲醇定容到10ml，得0.55mg/ml对照品浓溶液。 3供试品溶液的配制如下 方法1.称取紫草10g，加入100ml95%乙醇超声20min。放冷过滤，滤渣加入50ml95%乙醇超声10min。放冷过滤，合并滤液，减压浓缩回流至20ml左右。在50℃下进行干燥。 方法2. 称取紫草10g，加入100ml95%乙醇超声20min。放冷过滤，滤渣加入50ml95%乙醇超声10min。放冷过滤，合并滤液，加入2%的氢氧化钠溶液使pH到14左右，过滤，滤液加酸调pH到酸性，过滤，滤液减压浓缩回流至20ml左右。在50℃下进行干燥。 精密称定提取物的重量，把提取物加入乙醇中超声溶解，定容在100ml的容量瓶中得供试品溶液。 7稳定性考察 9紫草中左旋紫草素的含量测定 第二部分　紫草乳的制备 2基本工艺如下 方法一：把卵磷脂和大豆油先溶解（加VE 2滴），然后加入紫草提取物溶解得油相。甘油，PVP，F68加入水中得水相。搅拌机（5500转/分）搅拌得粗乳，粗乳过滤后超声（5秒/5秒/3分）得细乳。 方法二：将卵磷脂，VE和甘油，一起，加入少量水进行研磨，制成25ml的水溶液。紫草单独溶于大豆油（加VE 2滴防止氧化）中然后过滤得滤液。F68，PVP加入水中水浴（70℃，与油相混一起温度会降低。）溶解。然后将上面的溶液都放在搅拌机（5500转/分）中制粗乳。然后超声（5秒/5秒/3分）制备细乳。 3空白乳中卵磷脂用量考察 ４考察注射用大豆油的用量 结果：F68用量在1.0%~2.0%范围为最佳用量范围。 结果：1.2-丙二醇用量在12ml~18ml范围为最佳用量范围。 ７ 对F68，卵磷脂，大豆油，1.2-丙二醇进行正交实验 结果：最佳处方为F68：1.5g；卵磷脂：1.5g；大豆油：6ml；1.2-丙二醇：12ml。 ８乳剂的粒径的测定 方法：用最佳处方F68：1.5g；卵磷脂：1.5g；大豆油：6ml；1.2-丙二醇：12ml，Ve 2滴，甘油2.25ml，紫草提取物0.1g 。 按照基本工艺制备，用激光粒度仪测定乳剂的粒径。见下图： ９ 用紫外分光光度法测定乳剂中　紫草总色素的含量 方法：按照中国药典2000年版中紫草素含量的测定.取乳剂5ml，置于25ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀，用紫外分光光度法测定含量（λmax＝５１６nm ，E1%1cm=242,以左旋紫草素计），用空白乳作为对照测定。 结果： 测得紫草总色素含量为0.043%。 10 用HPLC法测定乳剂中左旋紫草素的含量 方法：取制备好的乳剂过微孔滤膜得供试品。 结果：测得左旋紫草素含量为0.001%。 第三部分 结论 （1）高效液相色谱法测定左旋紫草素含量方法为：选用甲醇-0.025mol/l磷酸（80：20）为流动相，测定波长：516nm。左旋紫草素进样量在0.176μg至0.88μg。采用外标一点法来进行含量计算。 致谢 本论文是在逄秀娟老师的悉心指导下完成的，在实验过程中得到实验室刘琳婕、段江瑛、高雪峰师姐以及买洁峰、高亮、刘阅娇、苏瑛同学的大力支持和热情帮助，在此表示衷心感谢，并对精心审阅论文的各位老师致以最真诚的谢意。 * * 图1.对照品中左旋紫草素的高效液相图谱 图2.供试品中左旋紫草素的高效液相图谱 表1.流动相的考察 7.840 7.538 甲醇-磷酸（80：20） 7.933 7.622 甲醇-磷酸（