动物实验（修改3）.pptVIP

医学动物实验研究方法 主要内容 第一节：医学动物实验概论 第二节：医学动物实验原理 第三节：医学动物实验实施 第四节：动物模型 第五节：遗传修饰动物模型 一、概念：动物实验是研究者根据研究目的，设计实验条件，选择合适的实验动物，通过人为干预，观察动物的反应，经统计学分析，以探讨或检验生命科学中未知因素作用的系列活动。 二、动物实验的意义和优越性 1. 意 义：替代人作为生物医学研究的对象 2. 优越性： 避免人体实验的风险 更容易获得疾病模型 可严格控制实验条件 简化收样和操作过程 更全面认识疾病本质 三、动物实验在医学中的应用 研究疾病的病因 探讨疾病的发病机制 指导临床治疗 新药评价与开发 第二节： 医学动物实验原理 一、动物选择的基本原则 标准化原则：选用实验动物 相似性原则：选择与人类组织结构、功能代谢及疾病特点最 近似的实验动物 差异性原则：利用不同种系实验动物间存在的差异，选择符 合实验要求的动物。 相匹配原则：动物质量等级要与实验设计、实验条件、实验 者技术与方法、试剂纯度等相匹配 易化性原则：确保研究目标的前提下, 选择结构、功能较简 单的实验动物 规格化原则：选择与实验要求一致的动物规格 （种属、品系、 等级、年龄、体重、性别、生理及健康状况） 可行性原则： 二、实验设计的基本原则 对照原则 空白对照 安慰剂对照 试验条件对照 标准对照 随机化原则 重复原则 均衡原则 三、实验结果分析的原则 数据整理：客观 统计分析：正确选择统计方法 第三节：医学动物实验实施 一、动物实验前的准备 实验条件的标准化 实验人员培训 预实验 二、动物实验干预和观察 干预要设对照，操作一致 观察细致、记录客观 三、动物实验后处理 检查资料 表格整理 统计分析 第四节： 动物模型 一、常用实验动物 小鼠（Mouse；Musculus） 大鼠（Rat；Rattus　norregicus） 豚鼠（guinea pig ；Cavia　porcellus） 地鼠（Hamster） 家兔（Rabbit；Oryctolagus　curiculus） 犬（Dog；Canis　familiaris） 猪（Swine；Sus　scrofa） 猴（Monkeys） 三、动物模型的概念和意义 1.概念：人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。 2.意义： 可复制 可按需取样 可比性 全面认识疾病本质 四、动物模型的分类 Spontaneous animal models：是取自动物自然发生的疾病，或由于基因突变的异常表现通过定向培育而保留下来的疾病模型。 Induced animal models：是物理、生物、化学等致病因素的作用，人为诱发出的具有类似人类疾病特征的动物模型。 五、动物模型举例 1、Pristane induced arthritis（PIA）： 第五节： 遗传修饰动物模型 一、转基因动物 1.概念： 转基因动物 ( transgenic animals)是指用人工方法将外源基因导入动物受精卵或早期胚胎细胞,使外源基因与动物本身的基因组整合,并随细胞的分裂而增殖,从而将外源基因稳定地遗传给下一代的工程化动物。 广义的转基因动物还包括knock in、knock out。 2.培育转基因动物的关键技术 外源目的基因的制备 外源目的基因的有效导入 胚胎培养与移植 外源目的基因表达的检测 3.转基因动物培育的主要方法 基因显微注射法 逆转录病毒感染法 胚胎干细胞介导法 精子载体导入法 二、基因敲除动物 1.概念：基因敲除动物（knockout animal）是通过一定途径使机体特定的基因失活或缺失的动物。 2.基因敲除的主要方法 同源重组（homologous recombination）： 应用DNA同源重组原理，用设计 的同源片段替代靶基因片段，从而 达到基因敲除的目的。 基因捕获(gene trapping)：利用随机插入突 变进行基因敲除 条件性基因敲除小鼠的构建方法 三、ENU（乙基亚硝基脲）诱