单核细胞增生李斯特氏.ppt

单核细胞增生李斯特氏菌检测和应用中的问题 河南检验检疫局技术中心 李志培 一、发现 1891??? 法国 Hayem 病人 1893 法国 Henli 病人 1911 ?? 瑞典 Hulphers 兔子肝脏 1925?? 在绵羊病例中首次确定为综合症 1926????murry 兔子 大单核细胞白血病 1927???pirie 非洲鼠肝中分离出该菌 1929 证实该菌可引起羊、牛流产、畜败血症等 1940??pirie建议用Listeria作为属名，按murry提出的种名monogenes 命名。 二、形态、培养特性和生化特性 G+ 短杆菌 0.5×1-3μm 两端钝园,两两相串成弯曲或V形兼性厌氧、无芽孢、在陈旧培养物中可成丝状及G-。从感染病灶处来集标本直接涂片则为球菌或球杆菌，由此易与类白喉杆菌混淆，或当作污染菌（杂菌）丢弃。有鞭毛1-4根，翻滚式运动。20-25℃培养时有动力，37℃培养时动力消失。发酵葡萄糖、乳糖、麦芽唐、鼠李糖、海藻糖、果糖等；不发酵木糖、棉子糖、甘露醇、肌醇、卫矛醇等。不利用枸橡酸盐，吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸 盐还原，赖氨酸、乌氨酸均阴性，VP、甲基红试验，精氨酸双水解试验均阳性。对营养要求不高,提高营养并不能增加李氏特菌的生长，在固体培养基上菌落很小，透明，边缘整齐。刺种血平板培养后可产生窄小的β溶血环。用45℃入射光照射菌落（TSA、TSAYE、MMA、LPM干板），通过解剖镜观察，可见菌落成蓝色、灰色、蓝灰色。在EMB和SS平板上不生长。 三、病原学 李氏菌共有7个种，只有单核细胞增生性李氏菌是人和动物的主要病原体。有16个血清型，其中1/2 a，1/2 b，4b这三个血清型引起90%以上人类疾病。其它：1/2 c，3a，3b，3c，4c，5等。 四、流行病学 单增李氏菌广泛存在于自然界中，在土壤、地表水、污水、废水、植物、青贮饲料、烂菜中都存在。未经处理的污水90%以上含本菌。经粪—口途径传播，污染食物是主要传播方式，85—90%。在牛、羊、猫、狗、猪、马、狐狸、鼠、鸡、野生鸟、鱼、蝇、昆虫等都发现和分离出该菌。健康人类便中携带率为0.6—16%；有70%的人可短期带菌，屠宰场工作人员10—20%为无症状带菌者，从事该菌研究的人员带菌率可高达77%。据调查资料：4—8%的水产品、5—10%奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的家禽均被该菌污染。从80年代开始，世界上已有多起李氏菌引起的疾病爆发，死亡率接近30%。 五、 临床表现 孕妇感染后表现很轻，但是传给胎儿或新生儿时则引起严重感染。胎儿全身各脏器都有播散性、多发性针尖大小黄白色小脓肿，肝脏最为显著，其次是脾、肾上腺、肺、肠胃道等。 潜伏期几天——几周。非妊娠患者表现为脑膜炎者约占50—60%，败血症和无灶性病变者约25—30%，脑实质性病变者约占10%，心内膜炎约占5%。 六、检测程序及有关问题1．程序 SN GB 前增菌 直接增菌 EB LB，30+1℃，24h ↓ | 30+1℃ 48h—7d ↓0.1ml 25g+225ml MBP | 10ml LB2 ↓ | | | 30℃,18-24h | ↓ ↓ | MMA.30+1℃ 48h 1ml+100ml EB 25g+225ml EB ↓ ↓ 45o斜光挑菌落 30℃，24—48h ↓ ↓ TSI、SIM、25+1℃ MMA或OXA 观察2—7d ↓ ↓阳性 35℃，24—48h TSA—YE纯培养 ↓ ↓ 可疑菌落接种TSA-YE←