分别用鲜草与干草生产的鱼腥草注射液指纹图谱对比研究.docVIP

分别用鲜草与干草生产的鱼腥草注射液指纹图谱对比研究 【关键词】 鱼腥草注射液 摘要 采用GCMS分析了21个厂家的鱼腥草注射液指纹图谱。结果发现，采用干草和鲜草生产的注射液的指纹图谱之间存在一定的差异。在药材干燥过程中发现，药材挥发油的含量及主要化合物的含量随干燥时间的变化与鱼腥草注射液的研究结果非常一致，结果说明鲜草注射液与干草注射液指纹图谱之间的差别主要是由于原药材的干燥程度所引起。在鱼腥草注射液指纹图谱标准制定中应该考虑到两类药材的影响。 关键词 鱼腥草注射液，指纹图谱，色谱质谱 1 引言 鱼腥草注射液是鱼腥草的水蒸气提取物，它被广泛地应用于痰热咳血、 白带、 尿路感染 [1]。在抑菌、抗病毒、治疗白血病、抗氧化和抗诱变等[２～４]方面也具有较好的疗效。鱼腥草主要生长在我国的东南和西南地区阴凉潮湿的山谷坡地，厂家根据自身的条件，有的采用干的鱼腥草，有的则用鲜药材。在我国鱼腥草注射液40多个生产厂家中，采用鲜草和干草生产注射液的厂家约各一半。研究两类原料生产的注射液产品之间化学成分是否存在差异，这些差异是否是由原料引起等问题，以增加产品质量的可控性非常重要。 2 实验部分 2.1 供试品的制备 分别取21个厂家的鱼腥草注射液200 mL，水蒸气蒸馏40 min，挥发油直接用正己烷收集，定容至2 mL。4℃储存。 鱼腥草于2004年8月，在湖南怀化湖南正清制药厂的鱼腥草研究基地采得，由怀化学院生物系伍贤进教授鉴定。按0.8 Kg/批，分成7批，在24±2℃条件下分别自然干燥0、0.5、1、2、4、8和16 d。然后按中国药典(2000 版)的要求提取鱼腥草药材的挥发油。4℃储存，分析时取20 μL挥发油，溶于1 mL的正己烷中。 2.2 GC/MS分析条件 GC2010型气相色谱仪、QP2010 质谱检测器（日本岛津公公司）；class5k 软件； OV1 毛细管柱 (30 m×0.25 mm i.d., 膜厚0.25 μm)。进样口温度280℃，检测器温度230℃，载气为氦气，恒流模式，流速0.70 mL/min，分流比10∶1，程序升温：50℃（6 min）10℃／min230℃（16 min）。进样量：1.0 μＬ。质谱检测器，电离方式EI，电离能量70 eＶ，质量范围20~450 Ｕ，扫描间隔: 0.2 s/次。 3 结果与讨论 3.1 干草和鲜草鱼腥草注射液GCMS 指纹图谱分析 鱼腥草注射液按上述的GCMS条件进行分析。1~10号厂家所用的原料为新鲜鱼腥草，11~21号厂家所用的生产原料为干草。为了使样品具有代表性，每个厂家注射液各取10批，GCMS分析后，对10批 注射液的指纹图谱求均值，各均值指纹图谱代表各厂家注射液指纹图谱，均值指纹图谱结果见图1。 图1 不同厂家注射液的均值指纹图谱（略） Fig.1 Mean fingerprints of Houttuynia cordata injections from different factories 为了表征两类注射液之间的差异，对其进行主成分分析。从图1可以看出，注射液中有些物质含量较高，比如19.3min附近的甲基正壬酮，其相对含量约30％~40%。这些大含量的物质可能将样品间的细微差别掩盖。为了更好地考察各样品之间的差异，采用加权方法对大峰进行处理后，再对21个厂家的指纹图谱进行主成分分析，用第一、二主成分做图，结果见图2。从图2可见，两类注射液的差别较明显：1~10号样本明显聚为一类，这类为鲜草注射液；除14号厂家外的其余10个厂家聚为第二类。14号厂家的注射液可能由于生产工艺等因素导致了其偏离了两类注射液。 将两类厂家注射液指纹图谱分别求均值，结果见图3。从图３可以看出，干草注射液指纹图谱中 a、b和c ３个峰的要比鲜草注射液指纹图谱大得多。 3.2 干燥过程中的鱼腥草药材GCMS指纹图谱分析 将鱼腥草在24±2℃条件下自然阴干，药材被分成7份，分别干燥0、0.5、1、2、4、8和16 d。然后提取挥发油进行分析。药材中挥发油含量分别为0.35、0.33、0.27、0.23、0.22、0.21和0.20 mL/kg。挥发油含量在前2 d的变化较大，随后，变化趋缓。 图2 主成分分析结果（略） Fig.2 The score plot obtained by principal components analysis 图3 两类鱼腥草注射液的平均指纹图谱（略） Fig.3 Mean pattern of two kind of Houttuynia cordata injection １． 鲜草注射液的平均指纹图谱（mean pattern of Houttuynia cordata injection made of fresh ra